杨务彬 李元宏 兰 鸿

    湖北医药学院附属太和医院药学部，湖北 十堰 442000

    熊胆粉为熊科动物黑熊Selenaretos thibetanus Cuvier经胆囊手术引流胆汁而得的干燥品，收载于国家药品标准《新药转正标准》第11册[1]，本品有一定的抑菌作用[2]，但其微生物限度检查一直采用常规方法检验，根据《中国药典》2010年版的要求，对原用的常规方法进行验证[3]。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器

    LDZX-40BI立式自动电热压力蒸气灭菌器(上海申安医疗器械厂)，DNP-9162型电热恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)，HH B11 600型电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)，LRH-150B生化培养箱(广东医疗器械厂)，超净台(苏净集团安泰公司)。

    1.2 培养基

    营养肉汤培养基，改良马丁培养基，营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，胆盐乳糖培养基，甘露醇氯化钠琼脂培养基，溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基，曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)，四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)，胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)，均购自中国药品生物制品检定所。

    1.3 阳性对照菌

    金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]，大肠埃希菌[CMCC(B)44102]，枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]，铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]，乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B)50094]，白色念珠菌[CMCC(F)98001]，黑曲霉菌[CMCC(F)98003]，均购自四川省食品药品检验所。

    1.4 供试品

    熊胆粉(购自四川省新鹿药业有限公司，批号：091203、091204、091205)。

    2 方法与结果

    2.1 供试液的制备

    2.1.1 供试液制备方法1

    取供试品10 g，加pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100 mL，混匀，作为 1∶10 供试液。

    2.1.2 供试液制备方法2

    取1∶10供试液25 mL加pH 7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至50 mL ......