郭林娜

    齐齐哈尔医学院解剖教研室，黑龙江齐齐哈尔 161006

    绿脓杆菌制剂(PA-MSHA)是用绿脓杆菌(甘露糖敏感性)菌毛株经过培养、灭活、纯化后磷酸盐(PBS)缓冲液稀释而成，其有效的药理部位在于甘露糖结合蛋白的菌毛，能特异性地与高甘露糖表达型的肿瘤细胞结合，诱导肿瘤细胞凋亡[1]。以往研究表明PA-MSHA改善人体的免疫状况、对恶性肿瘤有辅助治疗的作用[2-3]。本研究主要观察PA-MSHA对肝细胞癌的体外杀伤作用，为进一步研究杀伤机制提供依据，找到治疗肝癌的新药。

    1 材料与方法

    1.1 材料及仪器

    人肝癌细胞BEL-7402由哈医大一院中心实验室提供。RPMI-1640培养基为美国Promega公司生产，使用前加小牛血清至10%，青霉素、链霉素至100 U/mL。酶联免疫检测仪(Safie2型)奥地利公司。透射电镜(EM208S)荷兰菲利普公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 药物处理及分组 PA-MSHA原液浓度为10×107/mL，将其生理盐水稀释成10×107/mL、5×107/mL、2.5×107/mL、1.25×107/mL、0.631×107/mL、0.31×107/mL浓度组，稀释倍数为两倍，将各组稀释的药物作为MTT比色实验的实验组，其中5×107/mL、2.5×107/mL两组与肝癌细胞作用后，观察两组肝癌细胞形态学变化观察，各实验组药物均用生理盐水稀释。

    1.2.2 细胞培养 将复苏后的肝癌细胞BEL-7402接种于在37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养，培养液RPMI1640含10%小牛血清，100 U/mL链霉素，100 U/mL青霉素，每2天换液传代1次，观察有90%以上细胞成单层贴壁生长 ......