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编号:1605059
黑大蒜和鲜大蒜提取物对小鼠细胞免疫功能影响的比较
http://www.100md.com 2012年12月23日 中国医药导报 2012年第14期
细胞培养,1材料与方法,1实验动物,2主要试剂,3黑大蒜和鲜大蒜提取物溶液的制备,4动物分组与处理,5样品的采集,6NK细胞杀伤活性的测定,7脾细胞培养液上清中NO水平的测定,8脾细胞培养上清中IL-2,IFN
     张 鑫 陈浏丹 侯 颖 王大南 王 欢 吕昌龙

    1.中国医科大学基础医学院免疫教研室,辽宁沈阳 110001;2.辽宁省肿瘤医院检验科,辽宁沈阳 110042

    大蒜含有丰富的营养成分和药理活性成分。药理和临床证实大蒜有抗菌消炎、杀虫、抗癌、降血压、降血脂、降血糖、预防动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节功能等作用[1-2],其中最重要的有效成分是大蒜素[3]。

    近年来日本学者在控制湿度和温度的情况下,普通的鲜大蒜(白色)可以经过处理转化为黑大蒜。黑大蒜去除了大蒜的异味,带有甜味,口感好,无需再经处理即可直接食用。但黑大蒜在上述功能方面是否优于鲜大蒜,目前尚不清楚。已有研究报道黑大蒜较鲜大蒜含有更多的氨基酸、有机硫和S-烯丙基-L-半胱氨酸[4]。笔者前期研究已证明黑大蒜提取物对免疫功能有促进作用[5]。本文则就黑大蒜提取物和鲜大蒜提取物对免疫功能的影响进行了比较研究,可为黑大蒜的实际应用进一步提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    C57/BL-6小鼠6~7周,雌性,体重18~22 g,75只,购买于上海斯莱克实验动物有限公司(实验动物使用许可号:SCXK(沪)2007-0005)。

    1.2 主要试剂

    RPMI 1640(Thermo),LDH底物(NBT购自Sigma公司,NAD购自中国科学院生物研究所,乳酸钠购自上海试剂三厂,PMS购自Fluka公司),NP-40(Fluka公司),Griess反应液(Wako),IL-4,IL-17(EB),IL-2,IFN-γ和TNF-αELISA kit(R&D)。

    1.3 黑大蒜和鲜大蒜提取物溶液的制备

    1.3.1 黑大蒜提取物溶液的制备 黑大蒜粉由日本弘前大学佐佐木甚一教授提供。黑大蒜提取物按文献[2]的方法制备,即取一定量的黑大蒜粉加适量的无热源蒸馏水,100℃,煮沸2 h,自然冷却后4层纱布过滤,滤过液于4 000 r/min离心30 min,取上清,经冷冻干燥后即为黑大蒜提取物。临用时用生理盐水配成1 mg/mL溶液。

    1.3.2 鲜大蒜提取物溶液的制备 制备方法与黑大蒜提取物溶液相同。取新鲜鲜大蒜去皮,研磨成蒜泥,低温干燥成粉 ......

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