马 娟 陈吉丽 许 峰 张鸿青

    昆明市第一人民医院，云南昆明 650011

    随着现代医学的迅速发展，从基因水平阐明冠心病(coronary heart disease，CHD)尤其是早发CHD发病机制成为医学研究的热点[1]。早发CHD是冠心病的一种特殊形式，指冠心病发生时男性≤55岁，女性≤65岁[2]。国外人群研究显示内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)及亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenete trahydro folate reductase，MTHFR)的基因变异可能参与CHD的发生发展，为进一步探讨这两种基因多态性与早发CHD发病的相关性，笔者应用先进的基因芯片技术进行研究，现报道如下：

    1 对象与方法

    1.1 对象

    收集2007年1月～2009年12月在我院住院和门诊就诊的患者，根据缺血性心脏病(IHD)的命名和诊断标准入选CHD患者，入选人群之间无血缘关系。均行冠状动脉造影证实冠状动脉病变，至少一支主要血管狭窄程度≥50%。共完成基因芯片检测24例，其中女4例，男20例，平均年龄(49.60±6.23)岁，以男≤55岁及女≤65岁患冠心病为早发冠心病组；对照组入选65例，其中女22例，男43例，平均年龄(69.16±7.79)岁，以男>55岁及女>65岁患冠心病为迟发冠心病组。对两组的一般情况进行比较，早发CHD组年龄显著低于对照组(P=0)，三酰甘油显著高于对照组(P=0.003)，性别比列、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、左室舒张末径、左室收缩末径、左室射血分数差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

    1.2 基因多态性检测

    用上海百傲生物技术有限公司提供的基因芯片，可同时检测eNOS298、MTHFR667两个位点基因多态性。

    1.2.1 标本采集 用一次性无菌注射针头采集被检者静脉血0.5 mL，将血样放入含50μL的2% EDTA溶液的无菌1.5 mL离心管中，盖上管盖，上下颠倒数次使混匀。

    1.2.2 模板DNA的提取 取全血200μL加入红细胞裂解液600μL ......