供体应用钙调磷酸酶抑制剂预处理减少大鼠肾移植缺血再灌注损伤及机制
环孢素,克莫司,1材料与方法,1试剂与仪器,2实验动物及分组,3供体手术,4受体肾移植,5观察指标,6统计学方法,2结果,1钙调磷酸酶抑制剂对供体预处理后大鼠血清肌酐的影响,2移植肾组织中TNF
唐 建 徐 达 王祥慧 周佩军上海交通大学医学院附属瑞金医院移植中心,上海 200025
缺血再灌注损伤在肾移植领域是无法避免的事件。这一事件使得移植物抗原暴露,增加了移植物免疫原性。对移植肾的影响一方面增加早期移植肾功能延迟恢复及排斥反应的发生率,另一方面也与移植肾长期预后相关[1]。因此,积极寻找某种策略来减少移植过程中缺血再灌注损伤的发生就显得尤为重要。较缺血性预处理相比,药物性预处理具有无创、对机体损伤小的优势,其应用潜力巨大。因此,笔者设计本实验,初步探讨供体应用钙调磷酸酶抑制剂(CNIs)类药物预处理对肾移植缺血再灌注损伤的影响及其机制。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
大鼠 TNF-a ELISA 试剂盒(R&D systems,美国);大鼠HSP-70 ELISA 试剂盒(R&D systems,美国);酶标仪(Labsystems Multiskan MS,芬兰);自动生化分析仪(Hitachi 7000,日本);组织匀浆器(Pro Scientific,美国);环孢素 A(Novartis Pharma GmbH,德国);他克莫司(Astellas,日本)。
1.2 实验动物及分组
雄性Lewis近交系大鼠,体重220~280 g,不限饮食。按供受体随机分为3组:环孢素A组(CsA,10 mg/kg)、他克莫司组(Tac,1 mg/kg)、生理盐水对照组,每组8对大鼠。另设单肾切除组(n=8)作为空白对照。肾移植24 h前各组中供体作如下预处理(表1)。
1.3 供体手术
进腹后,首先游离左输尿管及膀胱,结扎并切断生殖静脉和左肾上腺静脉,完全游离左肾。左输尿管保留少许膀胱壁(直径约4 mm)切断。结扎肠系膜上动静脉并切断,向上游离主动脉及腔静脉至1.5 cm处。在肾血管以下0.3 cm处以3-0丝线穿过主动脉及腔静脉留置备用。头皮针从上方穿刺入主动脉,结扎备用线,切断上方腔静脉作为流出道,以4℃肾保存液及肝素钠灌注左肾。待左肾颜色变苍白一致时,取出左肾修整备用。

表1 肾移植24 h前各组中供的体预处理
1.4 受体肾移植
分别游离肾血管平面以下的腹主动脉与腔静脉 ......
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