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编号:1604375
红曲E-70及洛伐他汀对乳腺癌细胞MCF-7的增殖影响
http://www.100md.com 2012年7月30日 中国医药导报 2012年第26期
1材料与方法,1药物与癌细胞,2红曲E-70水溶液中的洛伐他汀含量测定,3癌细胞增殖抑制实验(MTT法),4统计学方法,2结果,1红曲E-70中洛伐他汀含量测定结果,2细胞形态学观察药物对MCF-7细胞的
     冯荣洁 吴 铁

    广东医学院药理教研室,广东 湛江 524023

    红曲是红曲霉菌(monascus purpureus)经液体深层发酵精致而成的一种纯天然、有益于人体健康的食品添加剂,也被称为天然他汀,是降血脂的天然保健品,洛伐他汀被认为是其主要的药效成分。近年来国内外学者发现,洛伐他汀对乳腺癌有明显地抑制肿瘤细胞增殖的作用[1-4]。但天然红曲是否也有抗癌作用,至今未有报道,本实验观察天然红曲70%乙醇提取物(红曲E-70)对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖影响,探讨该成分是否有抑制乳腺癌的作用,同时,与洛伐它汀进行比较,了解红曲的其他天然成分对洛伐他汀的抗癌作用是否有协同作用,为天然红曲作为预防乳腺癌的保健食品提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 药物与癌细胞

    ①红曲E-70:天然红曲(东莞市天益生物工程有限公司提供)70%乙醇提取工艺为天然红曲30 g,70%乙醇浸泡12 h,8倍量70%乙醇回流提取3次,每次2 h,合并提取液,回收乙醇,减压干燥后得70%乙醇提取物;②洛伐他汀:中国药品生物制品检定所;③人乳腺癌细胞MCF-7:来自ATCC,10%FBS RPMI 1640培养,隔天换液,3~5 d传代。

    1.2 红曲E-70水溶液中的洛伐他汀含量测定

    1.2.1 供试液的制备 红曲E-70 11.87 mg,用蒸馏水溶解定容至5 mL,过滤后待用。

    1.2.2 标准液的制备 精密称取洛伐他汀对照品0.40 mg,甲醇溶解定容至5 mL,超声;以此浓度用甲醇稀释成以下浓度,并定容至 5 mL,使终浓度为 0.005、0.01、0.02、0.04 mg/mL,过滤后待用。

    1.2.3 色谱条件 流动相: 甲醇∶0.002%磷酸溶液 (75∶25);流速:1 mL/min;色谱柱为 kromasil C-18;柱温:30℃;检测波长:238 nm;进样量:10 μL。

    1.2.4 每毫升红曲E-70提取液中洛伐他汀含量的计算 用标准曲线法求出红曲E-70水溶液里洛伐他汀的含量。

    1.3 癌细胞增殖抑制实验(MTT法)

    将处于对数生长期的MCF-7细胞用胰蛋白酶消化后 ......

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