杨淑红 杨嗣星 姚 颐 廖文彪 赵凯亮 李永伟 宋 超武汉大学人民医院泌尿外科，湖北武汉 430060

    支架材料是组织工程学研究的重要内容之一。理想的组织工程支架材料必须具有良好的生物相容性，而且适合种子细胞在支架上黏附、生长[1]。温度敏感性水凝胶(temperature sensitivity hydrogel，TSH)又被称为温固化水凝胶，当温度超过相变温度时，黏度急剧增高，由液态变为凝胶态[2]。本研究小组在前期已证实经TSH改良的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)所制备的复合支架材料与膀胱平滑肌细胞具有良好的相容性[3]。为给体内研究提供更充足的实验依据，本研究将进一步探索该支架材料与膀胱移行上皮的生物相容性。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料与设备

    新西兰兔由武汉大学实验动物中心提供；主要试剂有：PEO-PPO-PEO三嵌段共聚物(购于BASF公司)，小鼠抗兔细胞角蛋白单克隆抗体 (AE1/AE3)(购于Santa Cruz公司)，FITC标记羊抗小鼠单抗隆抗体 (购于Abcam公司)，磷酸缓冲盐溶液 (phosphate buffered saline，PBS)，甲醇、丙酮、戊二醛，DMEM F12培养基，Dispase酶，Ⅱ型胶原酶，胎牛血清(fatal bovine serum，FBS)，二甲基亚砜(DMSO)、MTT均购于Sigma公司。相差倒置显微镜 (日本OLYMPUS)，恒温培养箱(日本Napco公司)，超净操作工作台(北京半导体设备一厂)，扫描电子显微镜(日本SANYO)。

    1.2 方法

    1.2.1 兔膀胱移行上皮细胞的原代培养及鉴定 选用4周龄新西兰兔，雌雄不限，体重2.0～2.5 kg，空气栓塞处死后，无菌条件下取膀胱前壁组织(2 cm×2 cm)，小心分离膀胱黏膜与肌层，将黏膜层组织迅速置入含庆大霉素(20 μg/mL)的PBS中浸泡并漂洗3次。将黏膜组织剪碎成1 mm2大小的组织块，转入新鲜配制的Dispase酶消化液中，于4℃下消化18 h后再用PBS洗涤1次 ......