石金鑫 刘剑锋 王海滨 朱 平▲

    1.解放军总医院南楼心一科，北京 100853；2.军事医学科学院基础医学研究所前沿交叉学科研究室，北京 100850

    急性心肌梗死可在短时间内引起心肌细胞的大量死亡，心肌细胞的损伤严重程度取决于几个因素：初始梗死的大小、持续时间及是否有效微血管再灌注[1]。大量的实验研究表明，干细胞治疗能够提高心脏功能，促进心肌再生。骨髓间充质干细胞作为最常用的种子细胞之一，因其心肌分化效率很低，治疗心肌梗死修复主要通过旁分泌机制而非心肌再生，而使心脏修复得不到长期改善[2]。因此，心肌再生能力对于心肌梗死后修复至关重要。

    脂肪来源干细胞，因其具有取材方便、易于扩增及免疫原性弱等优势，已成为目前研究的热点[3]。脂肪组织分为白色脂肪和棕色脂肪。白色脂肪干细胞(white adiposederived mesenchymal stem cells，ADSCs)作为常用种子细胞之一，能够促进心肌梗死区新血管生成，提高受损心肌周围微血管再灌注，防止梗死后心肌细胞大量死亡[4]。棕色脂肪来源干细胞(brown adipose-derived mesenchymal stem cells，BADSCs)作为一种新来源的种子细胞，逐渐引起关注。有研究报道，从棕色脂肪中分离的干细胞具有较高的成心肌分化能力，且可在体外自发的分化为有功能的心肌细胞[5]。在笔者既往研究中发现，通过组合消化酶法能够高效的从幼年SD大鼠肩胛骨下脂肪中分离出BADSCs，并且能够在体外使其分化为功能性心肌细胞[6]。然而，BADSCs能否在心肌梗死大鼠中有效分化为心肌细胞，且是否比ADSCs更具优势，目前尚未明确。本研究拟开展两种不同脂肪来源干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的研究，旨在比较其改善心脏功能的效果，并探讨两者在梗死组织中促血管化作用及向心肌分化能力的差异。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 本研究采用随机对照动物实验。雄性SD大鼠[(80±20)g]用于体外分离脂肪组织，雄性 SD 大鼠(250 g左右)用于构建心肌梗死模型。所有动物均由北京军事医学科学院实验动物中心提供。

    1.1.2 试剂及抗体 CD29、CD45、CD90(Biolegend)，CD31、cTnT、vWAg(Sigma)，Dispase Ⅱ(Roche，Germany)，Ⅳ型 胶原酶(Sigma，USA，JF0710)，α-MEM(Gibco，USA，1342877)，胎牛血清(FBS)(MDgenics InC ......