吴广银 张 辰 王莉莉 姚志华 张明智

    1.河南省人民医院肿瘤放疗科，河南郑州 450003；2.郑州大学第一附属医院肿瘤内科，河南郑州 450052；3.郑州大学附属肿瘤医院 河南省肿瘤医院肿瘤内科，河南郑州 450003

    恶性淋巴瘤在我国虽然发病率不高，但恶性程度高，预后较差，特别是T细胞淋巴瘤经综合治疗5年生存率仅为30%[1]。沙利度胺(反应停，酞咪哌啶酮，Thalidomide)因导致胎儿畸形于20世纪60年代被禁用。1994年以来研究发现其具有调节机体免疫，抑制肿瘤血管生成等作用而用于多种肿瘤的治疗[2]。本文观察了沙利度胺对小鼠移植性T淋巴瘤的抑制作用，为其更好地应用于临床提供一定的实验依据。

    1 仪器与材料

    1.1 细胞株及实验动物

    BALB/C 纯系雌性小鼠，体重 18～22 g，6～8 周龄，购于河南省实验动物中心。EL-4细胞(鼠T淋巴瘤白血病细胞株)购自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。

    1.2 药品、试剂、仪器

    沙利度胺由常州制药厂生产，批号：0508241。原位细胞凋亡检测试剂盒(POD)，购自华美生物工程公司。TNF-α引物由上海生工生物有限公司合成，上游引物序列：5'-AGT CCG GGC AGG TCT ACT TT-3'， 下游引物：5'-GCA CCT CAG GGA AGA GTC TG-3'，扩增产物为422 bp。β-actin上游引物序列：5'-CCA GAG CAA GAG AGG TAT CC-3'，下游引物序列：5'-GGG GTG TTG AAG GTC TCA AA-3'，扩增产物为276 bp。Trizol购于invitrogen公司，rTag酶购于TaKaRa公司。

    2 方法

    2.1 模型的建立

    EL-4细胞悬浮生长于含15%胎牛血清的RPMI 1640培养液置培养箱。培养条件：37℃，5%CO2。选生长对数期细胞用于实验，无菌生理盐水调细胞浓度为5×106个/mL。取悬液0.2 mL接种于32只BALB/C小鼠右腋部皮下。

    2.2 抑瘤率实验

    接种后第2天，将32只小鼠随机分为4组，每组8只。①阴性对照组：小鼠 8只，生理盐水灌胃 25 mL/(kg·d)共14 d；②低剂量组：小鼠 8 只，沙利度胺灌胃 50 mg/(kg·d)共14 d；③中剂量组：小鼠 8 只 ......