范雪平 牛 兵 王倩倩 张 勇

    1.河南省口腔医院牙体牙髓科，河南 郑州 450052；2.河南省中医院口腔科，河南 郑州 450003；3.郑州人民医院口腔科，河南 郑州 450003；4.河南省驻马店市质量技术监督检验测试中心，河南 驻马店 463000

    变形链球菌(Streptococcus mutans，S.mutans)是公认的口腔主要致龋菌[1]，具有高度黏附于牙面的能力，变链菌在牙面上黏附和定植是变链菌致龋的始动因子[2]其黏附过程经历两个阶段后形成菌斑生物膜。第一阶段变链菌表面蛋白与获得性膜中宿主因子之间相互作用形成初始黏附，即非蔗糖依赖性黏附。第二阶段变链菌的葡糖基转移酶(glueosyltransferase，GTFs)利用蔗糖合成水不溶性葡聚糖来介导该菌的蔗糖依赖性黏附、集聚。变链菌通过黏附定居于牙面，形成致龋性微生态环境牙菌斑，利用糖产酸，导致牙齿脱矿，产生龋病[3]。细菌表面疏水性(cell surface hydrophobicity，CSH)是细菌非特异性黏附的重要部分，研究表明，细菌表面疏水性在细菌对牙面及口腔上皮细胞的初始黏附中起着重要作用，表面疏水性越强的细菌黏附力越强[4]。目前寻找安全有效的防龋物质是龋病防治研究的重点。羧甲基壳聚糖对诸多口腔细菌均有一定的抑制作用[5]，并具有良好的生物相容性和可降解性，可形成凝胶或膜状结构，尤其适用于口腔。目前对其在防龋方面的研究主要集中在抑菌方面，而对其防龋机制的研究报道较少。

    本研究采用微生物黏着碳氢化合物法(microbial adhesion to hydrocarbons，MATH)[6]， 测定不同浓度的羧甲基壳聚糖对变形链球菌表面疏水性的影响及在玻壁表面的黏附作用，探讨其影响变形链球菌黏附的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    3种羧甲基壳聚糖，平均相对分子质量(MW)分别为5500、10000、12000，脱乙酰度(D.D)均为 90.6%，由青岛海汇生物工程有限公司提供；TPY培养基，由北京陆桥技术有限公司提供。十六烷(沃凯)，购自国药集团化学试剂有限公司 (上海)。BHI培养基：OXOID LTD，Basingstoke，Hampshire，England。实验菌株变形链球菌 Streptococcus mutans，S.mutans ATCC 25175，菌株由四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室提供。

    1.2 实验方法

    1.2.1 菌液调整 将变形链球菌ATCC25175冻干菌株复苏并接种于 BHI固体培养基中 ......