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编号:1603031
阿托伐他汀对老年大鼠心肌衰老相关指标的影响
http://www.100md.com 2013年9月14日 中国医药导报 2013年第22期
糖苷酶,切片,1材料与方法,1试剂和设备,2动物模型建立,3心肌样本的制备,4心肌脂褐素,MDA含量的测定,5心肌衰老特异性β半乳糖苷酶含量检测,6统计学方法,2结果,1衰老大鼠心肌MDA,脂褐素及衰老特异性β半乳糖
     韩 磊 李鸣皋 叶 平

    1.海军总医院全军航海航空医学中心,北京 100048;2.解放军总医院老年心血管二科,北京 100853

    随着老年人口的逐渐增加,老龄化及其带来的老龄人口的健康问题正日益成为当前医学领域面临的主要问题之一,正确认识衰老发生发展的进程进而揭示其分子机制,成为当前医学工作者关注的热点之一。本研究以老年大鼠为研究对象,观察老年大鼠心肌丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脂褐素、衰老特异性β半乳糖苷酶等衰老相关指标的变化及阿托伐他汀干预对上述因素的影响。进而为研究衰老的病理机制和防护措施探索新的思路和方法。

    1 材料与方法

    1.1 试剂和设备

    Wistar大鼠(北京维通利华公司),阿托伐他汀(大连辉瑞制药有限公司,批号:75837005),衰老特异性β半乳糖苷酶检测试剂盒(南京建成生物工程研究所),脂褐素检测试剂盒 (南京建成生物工程研究所),MDA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所),台式高速离心机 (Sigma公司),高速冷冻离心机(Heraeus Labofuge 400),冰冻切片机(Leica CM1850),水浴锅(北京长风仪器仪表公司),荧光分光光度计(日本岛津RF-5301PC)。

    1.2 动物模型建立

    购买10个月龄的Wistar大鼠90只(北京维通利华公司),雌雄各半,饲养10~20个月龄。将大鼠随机分成3个组,每组30只,分别为老年对照组、大剂量和小剂量阿托伐他汀组。大、小剂量阿托伐他汀组分别给予阿托伐他汀[10 mg/(kg·d)、1 mg/(kg·d)]灌胃,老年对照组大鼠灌喂等量的 0.9%氯化钠溶液。每周定时对大鼠称重,依据体重情况确定阿托伐他汀的剂量。灌胃4个月后,老年对照组存活大鼠27只,小剂量阿托伐他汀组存活24只,大剂量阿托伐他汀组存活26只。再购入30只3个月龄的Wistar鼠作为青年对照组。

    1.3 心肌样本的制备

    灌胃4个月后,常规麻醉后快速取出心脏,部分心肌立即置于液氮中冻存备用;部分心肌于冰冻切片机上,沿与心脏长轴垂直方向进行连续切片,切片厚度为9 μm。将切片置于预冷的丙酮溶液中固定10 min后,储存于-80℃冰箱中备用。

    1.4 心肌脂褐素、MDA含量的测定

    采用南京建成生物工程研究所的MDA、脂褐素检测试剂盒进行 ......

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