刘守江 张 帆 魏 巍 覃林珍 闫 敬 王三清 王 健

    广东省深圳市南山区慢性病防治中心结核病防治科，广东深圳 518054

    微小 RNA(microRNA，miRNA)是一类广泛存在于真核细胞中，长度约20 nt的高度保守的非编码RNA调控因子，是由全长的mRNA样转录子加工而来，通过与对应的靶mRNA的3'非翻译区的非完全或完全配对结合，阻止其翻译或破坏其稳定性，实现对基因表达的调控，越来越多的研究表明，miRNA在肿瘤、糖尿病、心血管疾病、病毒感染等多种疾病中都起着重要作用，是正常和疾病状态下基因调节的一个新的机制[1-2]。近年miRNA在肺结核患者中表达也是研究热点之一。本研究主要探讨miR-29a-3p、miR-365a-3p分子在活动性肺结核(TB)和结核潜伏感染(LTBI)者外周血中的表达情况。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集深圳市南山区慢性病防治院(以下简称“我院”)结核病防治科门诊2012年1～10月诊治的TB患者30例，其中男 17例，女 13例，平均年龄(26.1±10.1)岁，诊断标准：经痰抗酸杆菌涂片阳性，临床症状结合X线表现、CT诊断以及病原学检查，符合全国结核病分类与诊断标准；LTBI者 30例，其中男 14例，女16例，平均年龄(28.9±9.5)岁，判定标准：采用结核菌特异性酶联免疫斑点试验阳性，而胸片未见异常[3]。两组研究对象之间的年龄、性别比较差异无统计学意义 (P>0.05)。所有研究对象均排除HBV、HCV、HIV病毒感染及其他慢性疾病如高血压、糖尿病、肾炎、自身免疫性疾病等。所有研究对象均经我院伦理委员会批准通过，并签署知情同意书。

    1.2 标本的收集和处理

    抽取外周静脉血2 mL，30 min内分装200 μL全血于冻存管中(已预装有Trizol和研磨珠)，振荡混匀后-80℃保存；根据Trizol Reagent试剂盒说明书(Invitrogen)抽提总RNA，核酸测定仪测定浓度和纯度，琼脂糖凝胶电泳分析RNA的完整性；-80℃保存。

    1.3 研究方法

    1.3.1 全血RNA提取 加入1 mL Trizol ......