生长因子-1诱骗寡核苷酸对大鼠颈总动脉球囊损伤后血小板源性生长因子-B B表达的影响
内膜,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,1在体转染效果观察,2血管病理形态学观察,3血管壁Egr-1和PDGF-BBmRNA表达结果,4大鼠Westernblot检
王泰然 刘闺男1.河北省邯郸市中心医院心内科,河北邯郸 056001;2.中国医科大学附属第一医院心内科,辽宁沈阳 110001
冠心病是临床多发病症,在现代社会当中,冠心病患者也逐年增加,临床治疗冠心病的方法较多,但目前为止还没有标准的治疗方案,从冠心病患者的形成机制进行研究,分析形成冠心病的主要因素,可以在很大程度上提高患者的临床治疗效果,达到临床治疗的目的。血小板源性生长因子 (platelet derived growth factor,PDGF)是促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的重要的生长因子,尤其是血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)刺激VSMC的作用更强烈[1-2]。文献证实,抑制其活性可以很好地起到抑制RS的作用[1-2]。本次研究主要通过大鼠颈总动脉球囊损伤后的PDGF-BB分析,观察生长因子-1诱骗寡核苷酸对其影响,进而分析临床治疗的可行性,详细研究内容如下:
1 材料与方法
1.1 材料
研究选用北京医科大学提供的健康雄性Wistar大白鼠96只,美国Baxter health corporation生产的2F Fogarty导管,Egr-1 decoy ODN、Egr-1 杂码寡核苷酸 (scrambled decoy ODN,decoy ODN SCR)、Santa Cruz公司出产的 Egr-1兔抗大鼠多克隆抗体,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)试剂盒、武汉博士的公司出产的PDGF-BB兔抗大鼠多克隆抗体,大连宝生物公司出产的PCR引物合成,瑞士Roche公司生产的FuGENE6试剂。
1.2 方法
首先采用10%水合氯醛对Wistar大鼠进行麻醉,之后取大鼠颈部中间入路,将大鼠的左颈部动脉进行钝性分离,使用血管夹进行左颈动脉暂时性的阻断,采用2F导管插入大鼠左颈动脉,注入0.2 mL的0.9%氯化钠,最后反复抽拉大鼠的左颈动脉,制作大鼠左颈动脉内膜损伤模型[3]。
将96只大鼠按照随机原则分为4组,每组大鼠24只,在分组之后,标注组别,并根据组别进行不同的手术及研究。其中第一组为假手术组,采用分离左颈动脉,之后不进行球囊拉伤;第二组为损伤组,在大鼠球囊拉伤之后注入200 μL的1 mmol/L MgCl2液;第三组为SCR组,拉伤大鼠的左颈总动脉后注入 200 μL 含有 500 μg SCR ODN、30 μL转染试剂FuGene6的1 mmol/L MgCl2液;第四组为治疗组 ......
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