罗国彪 舒建昌

    暨南大学医学院附属广州市红十字会医院消化内科，广东广州 510220

    肝纤维化是由于各种致病因子引起肝脏的损伤和炎症，导致纤维组织广泛增生和沉积，其发生、发展过程与细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的沉积与降解相对失衡有关，而ECM的变化和组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达有密切的关系，本研究通过动物实验方法，结合既往实验基础上[1]，采用酶联免疫吸附测定法、免疫组化染色法分别检测正常及肝纤维化大鼠血清及肝组织MMP-1及TIMP-1表达的变化，分析两者在肝纤维化中的作用，以期为肝纤维化预防提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 选择 2011年11月～2013年 11月，SPF级SD大鼠20只，体质量180～200 g，雄性，购自南方医科大学动物实验中心[SCXK(粤)200620015粤监证字2006B2008]。于广东省药物研究所标准SPF级动物实验室 (合格证号：2006C125号)进行动物饲养及实验。

    1.1.2 试剂 大鼠MMP-1及大鼠TIMP-1定量检测试剂盒(ELISA)(上海西唐生物科技有限公司)，大鼠抗MMP-1及大鼠TIMP-1单克隆抗体 (武汉博士德生物工程有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 肝纤维化模型建立：根据前期实验[2]及相关文献建模[1-3]。

    1.2.2 实验分组及处理 20只雄性SD大鼠适应饲养1周后，随机分为2组，正常组10只大鼠，不作其他处理，常规饲养12周；模型组10只大鼠，腹腔注射CCl40.025 mL(用花生油1∶6稀释)，每周3次，动物实验共12周。动物实验结束后，采用摘眼球采血法最大量取血，并置于未加抗凝剂的普通干净玻璃试管中。剖开大鼠腹腔暴露肝脏，留取肝脏左叶 ......