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编号:1602879
慢性肾病对大鼠骨折愈合的早期影响
http://www.100md.com 2013年10月17日 中国医药导报 2013年第26期
腺嘌呤,骨细胞,成骨细胞,1材料与方法,1动物模型的建立,2MicroCT分析,3生物力学测量,4统计学方法,2结果,1肾病造模4周后血清钙,磷,肌酐,尿素氮及甲状旁腺激素的变化,3讨论
     赵 波 杨惠林 吴志良 张志刚

    苏州大学附属第一医院骨科,江苏苏州 215006

    慢性肾病是指持续3个月以上的慢性肾损害或肾功能下降。当前慢性肾病已成为严重的公共健康问题,流行病学调查显示我国成年人群中慢性肾病发病率高达10.8%[1]。由于慢性肾病可引起矿物质代谢紊乱、继发性甲状旁腺功能亢进及内分泌紊乱等,患者常合并肾性骨营养不良,导致骨量的丢失及骨强度的下降,骨折风险显著增加。目前的研究热点主要在慢性肾病患者骨折的危险因素及骨折预防方面,然而慢性肾病对骨折愈合的影响尚不十分清楚。因此,本研究应用慢性肾病大鼠胫骨骨折模型,研究慢性肾病对大鼠骨折愈合质量的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物模型的建立

    2个月龄雄性SD大鼠40只,体重200 g左右,由苏州大学实验动物中心提供。适应性喂养1周后,将大鼠随机分为对照组与实验组,每组20只。实验组给予含0.75%腺嘌呤(SIGMA公司提供)饲料饲养,对照组予以普通饲料喂养。4周后,颈静脉抽血检测血清肌酐、尿素氮、钙、磷及甲状旁腺激素(PTH)水平,确定肾病造模成功,然后行右胫骨中段骨折造模及内固定。具体方法为:10%水合氯醛3 mL/kg腹腔注射,麻醉成功后,将大鼠仰卧固定于手术台上,右后肢硫化钠脱毛、安尔碘消毒,于右小腿中段前方做纵形皮肤切口,长约1 cm,暴露胫骨中段,环形剥离部分骨膜,用微型锯于胫骨结节下方约1 cm处横行锯断胫骨干,1 mm克氏针髓腔内固定,生理盐水冲洗伤口后,1号丝线分层缝合切口,腹腔注射青霉素10万U。两组大鼠术后均给予普通饲料喂养,自由饮水。骨折造模4周后,过量麻醉处死动物,切取右侧胫骨,拔除内固定,剔除软组织,4%多聚甲醛固定,-20℃冷冻备用。

    1.2 Micro CT分析

    标本室温下解冻后,采用Skyscan 1176 Micro CT(苏州大学骨科研究所)进行标本全长扫描,层间距18 μm,扫描电压50 kV,电流200 mA。扫描完成后将数据传输到图形工作站,应用Micro CT分析软件进行图像重建及3D分析。在CT扫描定位图上,以骨折线为中心,选取上下各100个扫描层面(共3.6 mm)进行骨痂形态学分析,应用线性插值方法,手动描绘出每个扫描层面的骨痂组织边界,分析参数包括组织总量(total bone volume,TV)、骨量(bone volume,BV)和骨体积分数(BV/TV)。

    1.3 生物力学测量

    完成 Micro-CT扫描后 ......

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