姜兆荣 高明利▲ 于 静 丛珊珊

    1.辽宁中医药大学附属医院风湿病科，辽宁沈阳 110032；2.辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110032

    类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜及周围结缔组织异常增生、关节进行性破坏为特征的慢性自身免疫性疾病[1]。传统的治疗药物，如免疫抑制剂、糖皮质激素、生物制剂等，虽能使部分患者的病情活动得以控制，但长期应用副作用较大[2]。间充质干细胞因具有免疫调节作用[3]，为RA治疗带来新的希望。本研究尝试采用hUCBSCs穴位移植方法治疗类风湿关节炎大鼠模型(CIA)，观察对白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)的影响，探讨 hUCBSCs穴位移植治疗RA的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验材料

    牛Ⅱ型胶原(C7809，5 mg，Sigma公司)；弗氏完全佐剂(098K8729-CAS9007-81-2，10 mL，Sigma公司)；流式细胞仪抗体PE-CD34。甲氨喋呤(MTX)，上海医药集团有限公司信通制药厂，产品批号002091。

    1.1.2 实验动物

    近交系雌性Wistar大鼠120只，动物年龄45～50 d，体重(180±20)g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。

    1.1.3 脐血

    选择辽宁中医药大学附属医院(以下简称“我院”)妇产科排除了 HIV、HBV、HCV、CMV、EBV、梅毒等急、慢性感染，无血液系统疾患及其他系统疾病的非高危妊娠健康足月产妇，新生儿为经阴道顺产且生后皮肤红润，四肢活动良好，无感染征象的脐血。本研究经我院伦理委员会通过，所有产妇及家属知情同意，并签署知情同意书。

    1.2 实验方法

    1.2.1 脐血干细胞分离

    将采集到的新鲜脐血用HES沉淀法分离脐血单个核细胞，制成MNC悬液，用台盼蓝拒染色试验测细胞存活率 ......