张 堃 池艳春 郭 静

    哈尔滨医科大学附属第四医院肾内科，黑龙江哈尔滨 150001

    蛋白尿是糖尿病肾病(DN)主要临床表现，也是引起肾脏损伤的独立危险因素，因此积极探讨蛋白尿的发生机制以及病理改变，对于临床DN的防治具有重大而深远的意义。近年来，足细胞的相关蛋白分子成为研究蛋白尿的发生、发展的热点，而WT1也成为影响足细胞功能的重要因子，对其研究发现可作为判定糖尿病肾病的早期指标。

    1 材料与方法

    1.1 实验模型的制备

    雄性 Wistar大鼠 56只，体重 200～300 g，适应性饲养1周后，随机将其分为两组，对照组(6只)和模型组(50只)。除对照组，其余所有大鼠均行戊巴比妥钠腹腔麻醉(30 mg/kg)后行右肾切除术，2周后给予腹腔注射链脲佐菌素(STZ，溶于0.1 mol/L枸椽酸缓冲液中，pH=4.5，65 mg/kg)；对照组仅注射相同数量的枸椽酸缓冲液。48 h后从尾静脉采血用微量血糖仪测定血糖，试纸法测定尿糖。连续3d空腹血糖≥16.7mmol/L，尿糖强阳性视为糖尿病大鼠模型成功。4周后，测定24 h尿蛋白量﹥30 mg为DN成模标准，未成功者剔除。 分别于 STZ 注射成模后第 1、2、4、8、12 周处死各模型组大鼠6只，各时间点大鼠处死前代谢笼内收集24 h尿液，-20℃保存待测；处死大鼠后用生理盐水灌冼，取左肾留取肾皮质，一部分用于病理切片观察和免疫组化检查；另一部分用于Western blot检测。对照组大鼠于第1、2、4、8、12周收集代谢笼24 h尿液测定蛋白量，12周时处死留取肾皮质分别做上述检测。

    表1 对照组与各模型组大鼠24 h尿蛋白定量的比较(mg，±s)

    表1 对照组与各模型组大鼠24 h尿蛋白定量的比较(mg，±s)

    注：与对照组比较，*P<0.05

    对照组模型组66 7.82±2.09 39.63±13.01*7.59±2.44 60.51±7.37*7.92±2.89 75.96±18.28*8.53±2.47 90.97±14.19*9.15±2.26 114.74±12.91*组别 只数 1周 2周 4周 8周 12周

    1.2 仪器与试剂

    STZ(美国 Sigma 公司) ......