体腔积液薄层液基细胞涂片免疫组化染色方法研究
间皮细胞,胸水,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,3讨论
王兴波 王 静 冯冬青 万晓书 王东梅1.河北省秦皇岛市第二医院,河北秦皇岛 066000;2.河北省秦皇岛市昌黎县妇幼保健院,河北昌黎 066600;3.河北省秦皇岛市妇幼保健院,河北秦皇岛 066000
薄层液基细胞技术(thin-layer cytology test,TCT)是20世纪90年代兴起的一项新技术,最早应用于妇科宫颈细胞学检查,并获得了良好的效果[1]。随后人们不断将此项技术应用到非妇科细胞学检查[2-4],并与传统脱落细胞学涂片比较,具有薄层、背景清晰、面积小、血液成分少、利于显微镜观察等优点,但在癌性体腔积液TCT检查中存在癌细胞比较散在或细胞团不如传统涂片立体感强等不足。经苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色癌细胞与间皮细胞的鉴别有时很困难,对癌细胞来源及分类更一筹莫展。体腔积液多数混有间皮细胞,常常需要免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色与癌细胞加于鉴别,并对癌细胞进行分类。IHC染色如果不先经HE染色,则不清楚TCT涂片中是否存在癌细胞或可疑癌细胞(目标细胞)或者TCT涂片是否合格,如果经HE染色而采取不同退色方法,会造成不同结果。有报道使用盐酸、高锰酸钾及草酸等对传统涂片和组织切片HE染色进行退色[5-6]。笔者曾在组织切片上采用抗原热修复方法退色,效果较好[7]。胸水TCT涂片IHC染色,由于每张TCT涂片中的细胞排列是随机的,常规IHC染色针对性较差,往往造成诊断困难,为了准确鉴别间皮细胞与癌细胞以及对癌细胞进行详细分类从而达到确诊目的,本小组采用双重免疫组化(double immunohistochemistry,DIHC)染色,即在一张 TCT涂片上,同时显示两种抗原成分[8],来弥补一些抗体敏感性虽高而特异性低的不足,收到良好效果,现报道如下:
1 材料与方法
1.1 材料
收集2009年3月~2012年3月秦皇岛市第二医院病理科肺癌伴胸水转移送检病例68例,年龄45~70岁,中位年龄63岁,64排CT均显示肺内占位病变,伴纵隔淋巴结肿大及胸腔积液。其中9例有锁骨上窝淋巴结肿大、质硬。经气管镜、穿刺活检或切取锁骨上肿大淋巴结等手段,获取组织学标本,并及时经10%中性甲醛固定,石蜡切片,经HE染色和IHC染色确定诊断为:鳞状细胞癌13例,腺癌40例,腺鳞癌6例 ......
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