杨 琨 董 武 荣 阳 赵艳敏 高笑天 汪 明 张 月 刘瑞雪

    1.辽宁省人民医院中心实验室，辽宁沈阳 110016；2.中国医科大学辽阳中心医院放射科，辽宁辽阳 111000；3.上海柯莱逊生物技术有限公司，上海 201201；4.辽宁省人民医院消化二科，辽宁沈阳 110016

    恶性肿瘤在我国居民疾病致死原因中位列第三，其中肺癌的致死率逐年上升。最近的研究数据显示，肺癌已经超过胃癌，成为所有癌症中每年致死人数最多的肿瘤[1]。目前肿瘤主要的治疗方法为外科手术切除，化疗、放疗。但肿瘤患者经过手术、常规化疗、放疗达到临床治愈后，体内仍残留肿瘤细胞，停止治疗后，残留的肿瘤细胞又开始增殖，经若干时间后会达到109个细胞，出现临床复发，这是治疗失败的主要原因之一。生物免疫治疗作为新的治疗方法最近得到了广泛的关注，其具有靶向杀伤、特异性高、不良反应小以及可以杀伤对化疗耐药的肿瘤细胞等优势[2-3]。目前在国内、外得到广泛应用的免疫细胞治疗是树突状细胞(dendritc cell，DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells，CIK)两种细胞联合治疗肿瘤，但传统治疗理念认为化疗药物可以杀死免疫细胞，所以生物免疫治疗经常在化疗间歇期进行，笔者查阅了一些国外的文献，认为只要掌握好化疗药物的剂量，在化疗期间也可应用免疫细胞治疗，本实验通过体外和体内两种途径，探究化疗药物紫杉醇对免疫细胞DC、CIK生物活性的影响和对抑制肿瘤能力的调控，为化疗期间同时应用免疫细胞治疗提供基础理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 肿瘤细胞株 肺癌A549细胞株来源于中国医科大学肿瘤研究所，由辽宁省人民医院生物治疗中心实验室体外传代培养。

    1.1.2 药品及试剂 基因重组人IL-2(北京双鹭药业股份有限公司)、抗-CD3单抗(CD3McAb)、淋巴细胞分离液(Ficoll Paque Plus公司)、Triton X-100(德国Applichem公司)、基因重组人IFN-γ(上海凯茂生物医药有限公司)、白细胞介素-1(IL-1)、RPMI Medium 1640培养基(美国 GIBCO)、胎牛血清(美国 GIBCO)、PBS缓冲液、紫杉醇注射液、酶联免疫检测仪、全自动血细胞分析仪、24及96孔板、复方枸橼酸钠保存液、流式细胞检测抗体 anti-CD86-FITC、anti-CD40-PE、anti-MHCⅡ-PE、anti-IL-12-PE均来自 BD公司 ......