王 森 高 敏 赵 毅 朱 伟 姜恩平 康海仙 姚运红 胡新荣

    1.广东医学院肿瘤研究所病理教研室，广东广州523808；2.广东省东莞市人民医院病理科，广东东莞523059

    RNA干扰HPV E6下调eIF4E转录表达抑制宫颈癌Hela细胞增殖并影响细胞周期进程研究

    王 森1高 敏2赵 毅1朱 伟1姜恩平1康海仙1姚运红1胡新荣1

    1.广东医学院肿瘤研究所病理教研室，广东广州523808；2.广东省东莞市人民医院病理科，广东东莞523059

    目的探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控，探寻HPV E6促癌的新途径，为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点。方法构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序，而后转染人宫颈癌Hela细胞，荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率。而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平，采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变，流式细胞术检测细胞周期。结果测序结果显示成功构建shE6质粒。shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h，E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%，76%。shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果最明显，增殖抑制率约为21%；相对于NC组，shE6组G0/G1期细胞比例显著增高，而S期比例减少，G2/M期未见明显变化。结论RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达，抑制宫颈癌Hela细胞增殖，并阻滞细胞周期于G0/G1期。eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点。

    宫颈癌；E6；真核细胞翻译起始因子；RNA干扰

    真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E，eIF4E)是新近发现的原癌基因，与肿瘤的发生发展密切相关。eIF4E是帽依赖性翻译起始必需的且起限速作用的翻译启始因子，被认为是控制真核细胞翻译的主要开关之一。人eIF4E基因定位于染色体4q21～q25，编码24 kD的多肽。尽管eIF4E在控制细胞增殖和转化的蛋白翻译的作用已被证实，其表达调控至今不明，特别是在特定肿瘤如鼻咽癌、宫颈癌等病毒密切相关肿瘤中的调节机制有待更深入研究。目前，eIF4E与宫颈癌关系的研究尚处于起步阶段。国内尚未见宫颈癌中调控eIF4E表达的报道。本研究利用RNA干扰技术探讨了HPV E6对eIF4E转录表达的调控作用，有助于阐明eIF4E及E6致癌的机制，为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点 ......