袁志坚 何文涓 周红 蒋美玲

    1.无锡卫生高等职业技术学校，江苏无锡214028；2.中国药科大学，江苏南京210009

    脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究

    袁志坚1何文涓1周红1蒋美玲2

    1.无锡卫生高等职业技术学校，江苏无锡214028；2.中国药科大学，江苏南京210009

    目的分离提取脂肪干细胞(ADSCs)，对其进行成脂、成骨的鉴定，并与脂肪颗粒混合移植，观察移植后的脂肪组织的存活情况。方法取大鼠腹股沟脂肪，磷酸盐缓冲液清洗，0.1%Ⅰ型胶原酶37℃消化1 h，离心，取沉淀，用含10%血清的DMEM培养基进行培养、传代，取第3代ADSCs用于成脂、成骨鉴定；另取第3代ADSCs用于移植，分为两组：ADSCs(密度为5×107/mL)0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组、脂肪颗粒1.5 mL组，分别移植于大鼠背部两侧，共移植24只大鼠，分别于2周、1、3个月时脱颈椎处死8只大鼠，再取出背部脂肪组织。结果大鼠ADSCs成脂、成骨诱导后，经油红O、茜素红染色呈阳性，移植2周、1个月时，两组取出的脂肪组织的体积变化不大；但移植3个月后，取背部脂肪组织，称重：脂肪颗粒1.5 mL组平均重量为(0.4551±0.0024)g，而ADSCs(密度为5×107/mL)0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组的平均重量为(0.7798±0.0033)g，两组脂肪组织的重量差异有统计学意义(P<0.05)。结论原代分离、培养的ADSCs生长状况良好，具有向成脂、成骨分化的能力，与脂肪颗粒混合移植后组织的存活率高，并能够改善脂肪颗粒单独移植时的液化吸收情况。

    脂肪干细胞；成脂诱导；成骨诱导；移植

    脂肪组织的获得快捷、方便，2001年，Zuk等[1]从脂肪组织中分离到了一种具有多向分化能力的干细胞，即脂肪来源干细胞(ADSCs)，有分化为脂肪、成骨、软骨、成肌等能力[2.3]，能够在体外稳定增殖，衰亡率低，少量的组织就可获得大量干细胞，适合大规模培养，是近年来的研究热点之一。单纯脂肪移植很容易出现组织液化吸收、形成纤维囊等问题，这些问题一直没有得到根本解决。本研究引入的ADSCs，具有自我复制和多向分化的能力，能够分泌多种生长因子及细胞因子，所以将ADSCs和脂肪颗粒混合移植[4]，会大大提高脂肪组织移植的存活率，降低液化、纤维化、坏死等不良反应[5.6]，本文就ADSCs辅助脂肪移植进行研究，旨在探索ADSCs在脂肪移植中的良好作用。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器与试剂 ......