陈永锋 王海晶 刘丁瑗 周向东

    1.第二军医大学西南医院呼吸科，重庆400038；2.解放军75600部队医院接诊室，广东深圳518048

    小分子NEK2干扰RNA 对肺癌细胞耐药的研究

    陈永锋1，2王海晶1刘丁瑗1周向东1

    1.第二军医大学西南医院呼吸科，重庆400038；2.解放军75600部队医院接诊室，广东深圳518048

    目的探讨小分子NEK2干扰RNA(siRNA-NEK2)逆转人肺癌耐药细胞(A549/DDP)耐药性的研究。方法应用Real-time PCR法及Western blot法验证NEK2基因在人肺腺癌耐药细胞系(A549/DDP)细胞系呈现高表达；并采用脂质体为转染介质，将NEK2小片段RNA导入A549/DDP细胞沉默NEK2基因；应用MTT法观察顺铂、阿霉素对沉默NEK2基因后的A549/DDP细胞的细胞毒活性变化。结果NEK2-mRNA、NEK2蛋白在A549/ DDP细胞系表达水平均显著高于A549细胞系，差异有统计学意义(P<0.05)；顺铂、阿霉素对A549/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)分别是(53.08±0.56)、(8.09±0.31)μg/mL，对siRNA-control A549/DDP细胞的IC50分别是(53.09±0.78)、(8.10±0.98)μg/mL，而对siRNA-NEK2 A549/DDP细胞的IC50有显著下降，其值分别是(18.59±0.10)、(2.30±0.14)μg/mL，两组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论小分子NEK2干扰RNA沉默NEK2可以提高耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性。NEK2可能成为逆转肺癌耐药的一个新的靶点。

    肺癌；细胞耐药；NEK2；siRNA-NEK2

    肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康，已成为世界上死亡率第一位的恶性肿瘤。约80%的患者就诊时已属晚期，化疗成为其主要治疗手段，而肺癌耐药现象的产生是影响化疗效果的重要原因。已有研究表明，肿瘤细胞耐药的分子机制极其复杂，除了进入肿瘤细胞内的药物浓度减少外，DNA断裂修复加速、靶基因突变、扩增、以及凋亡抑制蛋白的表达差异等均会导致肿瘤细胞耐药[1]。因此，逆转肺癌耐药的发生，已经成为肺癌治疗研究中的热点。NEK2(NIMA-related kinase 2，NEK2)是一种哺乳动物细胞中的NIMA相关激酶，属于中心体相关蛋白激酶[2]。NEK2及其同系物过表达可以聚集中心体而过快推进有丝分裂进程甚至直接触发染色质的分裂[3] ......