张睿+张军+赵承斌

    哈尔滨医科大学附属第四医院骨科，黑龙江哈尔滨 150086

    [摘要] 目的 探讨激活态雪旺细胞(SCs)对神经干细胞(NSCs)的分化作用。 方法 取出生24 h内的SD乳鼠脊髓NSCs，分离培养并传至4代。取体重(100±5)g的SD大鼠，结扎右侧坐骨神经，1周后取双侧坐骨神经，左侧提取正常坐骨神经分离培养SCs(普通SCs)，右侧提取结扎变性的坐骨神经分离培养SCs(激活态SCs)，均采用双酶消化加差速贴壁法。将SCs与NSCs应用Transwell培养皿联合培养，分为三组：A组为激活态SCs与NSCs；B组为普通SCs与NSCs；C组仅为NSCs。于培养的第2、4、6天检测各组NSCs活性。1周后，Western blot检测各组SCs表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平，免疫荧光检测各组NSCs分化比例。 结果 传至4代的NSCs生长稳定，分离的SCs 7 d后大量增殖呈旋涡状。联合培养后MTT法检测细胞活性，第2、4天三组细胞的活性差异无统计学意义(P > 0.05)，第6天C组活细胞比例开始降低，A、B组与C组比较差异有统计学意义(P < 0.05)，A组与B组比较差异无统计学意义(P > 0.05)。Western blot检测A组细胞表皮生长因子(EGF)表达水平(0.486±0.028)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平(0.385±0.023)均高于B组，差异有统计学意义(P < 0.05)。MAP-2荧光染色，每高倍视野阳性细胞比例A组[(35.26±2.53)%]高于B组[(27.63±3.45)%]，差异有统计学意义(P < 0.05)；GFAP荧光染色，每高倍视野阳性细胞比例A组[(62.42±3.78)%]低于B组[(70.18±1.26)%]，差异有统计学意义(P < 0.05)。 结论 激活态SCs能够促进NSCs向神经元的分化进程，提高神经元的分化比例。

    [关键词] 雪旺细胞；神经干细胞；细胞分化；联合培养；神经元

    [中图分类号] R741.02 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2014)03(a)-0019-04

    Effect of activated Schwann cells in inducing differentiation of neural stem cells

    ZHANG Rui ZHANG Jun ZHAO Chengbin

    Department of Orthopedic ......