王 燕 曾 燏

    1.川北医学院病原生物与免疫学教学实验中心，四川南充637000；2.西华师范大学生命科学院，四川南充637002

    细菌鞭毛染色培养条件的研究

    王 燕1曾 燏2

    1.川北医学院病原生物与免疫学教学实验中心，四川南充637000；2.西华师范大学生命科学院，四川南充637002

    目的比较细菌在不同培养基和不同菌龄条件下鞭毛的染色效果，探索细菌鞭毛染色形态鉴定理想的培育基和培育时间。方法①将普通变形杆菌分别接种在肉汤培养基、琼脂培养基、血琼脂培养基3种不同培养基内，37℃培养18 h后，染色镜检，选择取出染色效果最好的理想培养基；②将普通变形杆菌接种到理想培养基上分别培育8、12、18、24 h不同时间后，染色镜检，选择出细菌鞭毛染色效果最好的培育时间。结果①血琼脂中培养的细菌鞭毛结构清晰、形态完整、背景干净，镜检效果最好；②12～18 h菌龄的细菌菌体中等大小，鞭毛清晰完整，镜检效果好。结论血琼脂是鞭毛染色教学和形态鉴定理想的培养基；12～18 h是细菌在血琼脂培养基中的最佳生长时间。

    鞭毛染色；培养基和培养时间；镀银染色；普通变形杆菌

    细菌鞭毛是指存在于细菌细胞壁外的呈波浪弯曲的细长丝状物，是细菌的运动器官。细菌鞭毛在不同细菌中的着生位置和数量是不一样的，是细菌种类鉴定和分类的重要依据之一[1-4]。细菌的鞭毛非常纤细，长5～20μm，直径仅10～20 nm，小于光学显微镜的0.2μm的分辨率，因此，鞭毛需经过增粗直径后再染色才能在光学显微镜下观察[5]。鞭毛的染色效果与细菌的培养条件和培养基的类型密切相关，如刘少有等[6]发现嗜肺军团菌在BCYE培养基上生长的鞭毛较NYE培养基中数量多、生长好；谢文熙[7]研究结果表明，8～12 h为细菌鞭毛染色的最佳观察时间。

    普通变形杆菌(proteus vulgaris)，广泛分布于自然界，为周鞭毛菌，易于观察，是细菌鞭毛教学和实验的理想菌种之一。鞭毛染色步骤繁琐且结果不稳定，不同的培养基和培养条件对细菌鞭毛的染色效果影响很大，如何选择合适的培养基和培养条件是细菌鞭毛形态学研究的热点问题之一[8-11]。同时由于操作过程复杂，影响因素多，成功率偏低，使得鞭毛染色在基础医学教学中往往较难取得预期的效果。因此，本研究以普通变形杆菌为菌种，通过常规染色方法(镀银染色法)来比较普通变形杆菌在不同培养基(基础肉汤培养基、普通琼脂培养基、血琼脂培养)和不同培育时间(8、12、18、24 h)下的鞭毛染色效果，探讨适宜普通变形杆菌鞭毛培育的最佳条件(培养基和培育时间) ......