张 力张瀚彬陈 淼 邬永富 黄浩海 祝葆华 杨慧龄

    广东医学院中美肿瘤研究所，广东东莞 523808

    宫颈癌是全球女性恶性肿瘤中第3 位最常见的 癌症，也是导致女性癌症患者死亡的第4 大原因，并占了近10%的新诊断癌症病例和8%的癌症死亡总数[1]。全球宫颈癌发病率在1980 年每年约378 000 例，到2010 年已增加到每年约454 000 例[2]。 据估计每年我国新发宫颈癌病例约100 000 例，占世界子宫颈癌新发病例总数的1/5[3]。目前宫颈癌的主要治疗手段是手术、放射治疗和化学药物治疗。

    在自然界中，水是由氕(H)和氘(D)两种氢的非放射性稳定同位素和氧组成的化合物。氘与氧组成的水称为重水，天然水中，氘和氕的比率(D∶H)大约是1∶6600，即自然界水中氘的体积分数为0.0139%～0.0151%[4-8]。 因此，把氘体积分数低于0.015%的水称为低氘水(DDW)。 由于氘对氕在质量上相差约1 倍以及C-D 键比C-H 键牢固不易断裂，水中同位素氕和氘含量的变化会导致水的物理化学和核性质显著差异。 有研究表明，氘能置换生物体内的氕并蓄积下来，随着生物体内氘浓度的增加，氢键间交联发生改变，从而使细胞质刚性显著增加，有丝分裂受阻滞[9-12]。饮用DDW 可以预防疾病、延缓衰老、活化机体免疫细胞[13-14]。近年国外核医学领域和水生理学领域对DDW在某些癌症等疾病的辅助治疗的应用研究有了重大突破[15-18]。 本文中将比较多种含有不同浓度氘的培养基对Hela 细胞株生长影响。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与材料

    DDW(体积分数为0.005%，50×10-6)购自上海奥特泉公司；胎牛血清(FBS)购自Gibco 公司；宫颈癌细胞株Hela 购自美国ATCC， 并由中美肿瘤所保种；DMEM、RPMI 1640 培养基购自Gibco 公司；PI 染料购自北京索莱宝公司；核糖核酸酶A(RNaseA)购自Invitrogen；MTT 试剂盒购自北京索莱宝公司；p21 Waf1/Cip1(12D1) Rabbit mAb 购自Cell Signaling；βactin (13E5) Rabbit mAb 购 自Cell Signaling；Alexa Flour 800 goat anti-rabbit lgG(H+L)购自Invitrogen；Na+/K+-ATPase ɑ (H-3) mouse monoclonal lgG2b购自Santa Cruz； 免疫组化试剂UltraVision Quanto Detection System HRP Quanto & DAB Quanto 购自Thermo Scientific；其他试剂均为进口分析纯 ......