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编号:1601919
乌司他丁对大鼠缺血再灌注心肌细胞的保护机制
http://www.100md.com 2014年10月17日 中国医药导报 2014年第20期
炎症,1材料与方法,1实验动物及试剂,2分组及模型制作,3生化指标检测,4心肌缺血和梗死范围测定,5Westernblot法检测IL-6,IL-8蛋白水平,6统计学方法,2结果,1各组MDA,CK-MB水平比较,2心
     王媛媛 曹 建 邓 莉 陈 勤 欧阳先国

    1.南昌市第三医院心内科,江西南昌 330009;2.南昌大学第二附属医院麻醉科,江西南昌 330006

    乌司他丁是一种广谱的蛋白水解酶抑制剂,可以抑制体内多种蛋白水解酶的活性,调节炎症细胞因子的释放,减少炎症细胞浸润[1]。研究表明氧自由基、钙超载、心肌纤维能量代谢障碍、中性粒细胞和细胞凋亡等因素均可能参与心肌缺血再灌注损伤心肌的发病过程[2-3]。本实验检测了乌司他丁对缺血再灌注细胞的心肌组织梗死范围及白细胞介素-6(IL-6)、IL-8的表达,探讨乌司他丁对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及试剂

    取10周左右雄性SD大鼠30只,体重(200±20)g(南昌大学动物实验中心提供),乌司他丁注射液,100 000 U/瓶(广东天普生化医药股份有限公司生产,批号03080806),超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛(MDA)检测试剂盒(武汉亚法生物制品有限公司生产),anti-IL-6、anti-IL-8、小鼠单抗辣根酶标记兔抗山羊IgG、anti-β-actin 山羊单抗(SantaCruz产品)。

    1.2 分组及模型制作

    30只SD大鼠随机分为3组,分为假手术组、缺血再灌注(I/R)组、I/R+乌司他丁组,每组各10只。假手术组,丝线穿过冠状动脉左室支但不结扎,经尾静脉注射生理盐水。I/R组参考赵秀梅等[4]的垫扎球囊法制作大鼠模型。将充盈的球囊(215 mm×10 mm)垫于冠状动脉前降支与结扎线之间,用力结扎,观察结扎区域变白,局部心肌运动减弱,两个以上导联上出现ST段明显上抬,提示结扎成功。45 min后将球囊快速抽空便可即刻实现前降支血流再灌注(以心电图相关导联ST段明显回落为标准),并持续再灌注3 h。I/R组,结扎冠状动脉后5 min分别通过尾静脉接受静脉注射注射生理盐水,45 min后放松扎线使冠状动脉再通形成再灌注3 h至实验结束;I/R+乌司他丁组结扎左冠状动脉左室支前30 min静脉注射乌司他丁(50 000 U/kg) ......

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