鲍俊杰 邹 勇 陈小红 张白杜

    1.广州市妇女儿童医疗中心检验科，广东广州 510180；2.中山大学附属第三医院输血科，广东广州 510630

    同种异体输血可导致免疫功能抑制，一旦发生免疫抑制，人体更易受到细菌、病毒和肿瘤的侵袭，临床上通常表现为术后较高的细菌感染发生率和恶性肿瘤复发率[1-3]。目前关于同种异体输血导致的免疫抑制的机制仍不明确，已有报道显示同种异体输血能够抑制自然杀伤(NK)细胞的功能[4-8]。本研究通过分析β重型地中海贫血儿童NK细胞的表达频率及杀伤活性，旨在探讨长期输血对β重型地中海贫血儿童NK细胞细胞频率及杀伤活性的影响，为重型β地中海贫血儿童临床免疫监测和治疗提供理论基础。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选择2011年1月～2013年12月在广州市妇女儿童医疗中心及中山大学附属第三医院进行输血治疗长达3年的β重型地中海贫血儿童20例为β重型地中海贫血组，其中男13例，女7例，年龄(9.90±4.87)岁。排除贫血以外的其他疾病如细菌、病毒性感染、肿瘤等。选取同期同龄健康体检儿童20例作为对照组，男 11例，女 9例，年龄(10.80±5.92)岁。 所有患者及患者家属均知情同意。

    1.2 仪器与试剂

    BD LSRⅡ流式细胞仪 (美国BD公司)，FITC标记的鼠抗人CD3、APC标记的鼠抗人CD56、PE标记的鼠抗人CD107a、鼠抗人lgG1同型对照抗体、红细胞裂解液、阻断剂GolgiStop均购自美国BD公司；刺激剂佛波酯(PMA)、钙离子导入剂伊屋诺霉素(Ionomycin)购自美国Sigma公司，人淋巴细胞分离液购自天津灏洋生物。

    1.3 研究方法

    1.3.1 NK细胞比例分析 取100 μL无菌外周抗凝血，加入FITC标记的鼠抗人CD3、APC标记的鼠抗人CD56单克隆抗体各20 μL,室温闭光孵育30 min ......