曹 玲 刘莉莉 王连芝 付 蕾

    黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨 150040

    中药指纹图谱是指中药材、提取物或中药制剂等经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材、提取物或中药制剂特性的共有峰的图谱。从1984年香港中文大学中药研究中心提出了开展中药成分 “指纹”鉴定工作的设想以来，我国就开始了指纹图谱的研究[1]。国家药品监督管理局于2000年颁布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》[2]，要求中规定，为确保中药注射剂质量稳定、可控，中药注射剂在固定了中药材品种、产地和采收期的前提下，需要制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。特别是在《中国药典》(2010年)中，建立了能反映中药整体特性的色谱指纹图谱方法(如满山红油、薄荷素油、积雪草总苷、莪术油、丹参酮提取物、丹参总酚酸提取物、三七总皂苷和三七三醇皂苷等药材及其提取物)。指纹图谱技术在我国中药质控方面得到了迅速发展。

    2000年罗国安等[3]提出了多维指纹图谱的概念。多维指纹图谱，即采用多种分析仪器联用的模式来建立指纹图谱(如 HPLC-DAD-MS、HPLC-MS-MS、GC-MS、CE-MS[4])。多维指纹图谱的优点是在色谱分离的同时还能进行光谱的在线检测，从而产生的数据既包括色谱的化学信息又包括光谱的信息。因此，这一方法特别适合中药及其制剂这一复杂体系的测定。

    建立多维指纹图谱的组合方式主要包括：不同柱子的串并联、不同检测器的串并联、不同色谱方法的组合及不同仪器间的组合。建立多维指纹图谱的一些常见联用技术主要有高效液相色谱-光电二极管阵列检测器(HPLC-DAD)、高效液相色谱-光电二极管阵列检测器-质谱(HPLCDAD-MS)、高效液相色谱-光电二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)、高效液相色谱-光电二极管阵列检测器-核磁(HPLC-DAD-NMR)、毛细管电泳-质谱(CE-MS)、气相色谱-质谱(GC-MS)等。

    1 HPLC-DAD

    高效液相色谱仪的DAD检测到的图谱是三维谱图，用DAD建立指纹图谱，得到的图谱就是最简单的多维指纹图谱。DAD的光栅在流通池后，用阵列二极管同时测定各个波长的光强度，因此在每一个色谱时间点上都可以同时得到紫外光谱图，而且得到的光谱图会随着色谱保留时间方向上的化学成分和浓度的不同而发生变化。测得的数据中既包含色谱信息也包含光谱信息。色谱的保留时间结合光谱信息可以用来进行定性鉴定，而色谱的峰高与峰面积等可以用来进行定量检测[5] ......