田飒 彭学军 何宇明 吴蓉

    中南大学铁道学院职工医院内科，湖南长沙410075

    硫化氢通过调控沉默信息调节子1抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤

    田飒 彭学军 何宇明 吴蓉

    中南大学铁道学院职工医院内科，湖南长沙410075

    目的观察外源性硫化氢(H2S)对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其可能机制。方法用25 mmol/L D-葡萄糖(高糖)、外源性H2S供体硫化氢钠(NaHS)(5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3和5×10-3mol/L)及沉默信息调节子1(SIRT1)特异性抑制剂尼克酰胺(40 mmol/L)处理HUVECs细胞株24 h。实验分为对照组、高糖组、甘露醇组、NaHS(5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3mol/L)组、高糖+NaHS(5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3和5×10-3mol/L)组和高糖+NaHS(10-3mol/L)+尼克酰胺组。采用MTT比色法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞内的内活性氧(ROS)水平，Western bolt法检测SIRT1的表达。结果与对照组比较，高糖组细胞活力显著降低[OD值分别为(0.76±0.09)和(0.18±0.01)，t=5.34，P<0.05]，细胞内ROS水平显著增加[ROS水平分别为(356.18± 42.96)au和(1183.63±84.31)au，t=6.72，P<0.05]。与高糖组比较，高糖+NaHS(5×10-4、1×10-3和5×10-3mol/L)组细胞活力显著增加[OD值分别为(0.18±0.01)、(0.39±0.05)、(0.68±0.04)和(0.51±0.08)，t1=3.16，t2=3.95，t3=3.86，均P<0.05]，细胞内ROS水平显著降低[ROS水平分别为(1183.63±84.31)、(874.32±85.36)、(628.65±54.27)和(439.56±53.64)au，t1=3.46，t2=3.97，t3=5.13，均P<0.05]。与对照组比较，高糖组细胞中SIRT1蛋白表达显著下调[蛋白相对表达量分别为(0.48±0.04)和(0.17±0.03)，t=3.94，P<0.05]。与高糖组比较，高糖+NaHS(10-3mol/L)组细胞中SIRT1表达显著上调[蛋白相对表达量分别为(0.17±0.03)和(0.59±0.08)，t=4.36，P<0.05]。SIRT1抑制剂尼克酰胺取消了NaHS抑制高糖诱导的HUVECs细胞活力的降低[高糖+NaHS组和高糖+NaHS+尼克酰胺组OD值分别为(0.52±0.04)和(0.23±0.03) ......