邬志坚 江慧玲 陈泳晖 刘宁平

    广州市番禺区中医院神经内科，广东广州511400

    VEGF165质粒转染骨髓间充质干细胞立体定向移植对局灶性缺血大鼠脑血管新生的影响

    邬志坚 江慧玲 陈泳晖 刘宁平

    广州市番禺区中医院神经内科，广东广州511400

    目的观察pEGFP-VEGF165质粒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)可否促进脑缺血大鼠血管新生。方法全骨髓贴壁法分离获取第三代BMSCs，当BMSCs生长汇合率为80%～90%时以脂转法转染pEGFP-VEGF165质粒。制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分为模型组、BMSCs移植组(BMSCs组)、转血管内皮生长因子(VEGF)基因BMSCs移植组(BMSCs/VEGF组)。于造模后7、14、21 d进行神经行为学评分，免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区血管内皮细胞标志物CD34和VEGF的表达，激光共聚焦显微镜观察血管生成情况。结果BMSCs组与BMSCs/ VEGF组大鼠神经功能(BRS)评分较模型组明显降低(P<0.01)，BMSCs/VEGF组BRS评分低于BMSCs组，但差异无统计学意义(P>0.05)。与非缺血侧比较，BMSCs组和BMSCs/VEGF组缺血侧微血管直径、微血管面积均较其显著增加(P<0.05或P<0.01)；BMSCs组和BMSCs/VEGF组微血管直径、微血管面积均较模型组显著增加(P<0.05)，但BMSCs组与BMSCs/VEGF组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。7 d时BMSCs/VEGF组VEGF阳性细胞较BMSCs组VEGF表达显著增加(P<0.05)，其他时间点两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；BMSCs/VEGF组CD34阳性表达在各时间点较BMSCs组有所增加，但差异无统计学意义(P>0.05)。结论经VEGF基因修饰的BMSCs移植可提高缺血区血管生成，仅在移植后7 d比单纯BMSCs移植VEGF表达升高有显著性差异，在神经行为学评分、微血管新生、CD34表达等方面与单纯BMSCs比较，无明显优势。原因可能与VEGF165质粒转染效率不高及脑血管新生机制复杂有关。

    血管内皮生长因子；骨髓间充质干细胞；血管新生

    脑梗死具有高发病率、高病死率、高致残率的特点[1]，对人类健康危害极大，探索一种治疗脑梗死的新方法势在必行。干细胞能促使损伤后的神经细胞再生和修复[2]，但是由于脑血管的闭塞，实施局部神经干细胞成功移植后，也无法有效建立侧支循环，使得移植后神经干细胞会出现明显的缺血缺氧状况而坏死 ......