陈旭央等

    [摘要] 目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-33(IL-33)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)等细胞因子在哮喘发病机制中的作用。 方法 选择浙江省乐清市人民医院2011年2月～2014年8月收治的82例哮喘患者作为研究对象，根据患者的临床表现分为急性发作组(45例)、缓解期组(37例)，并选取同期健康人群40例作为对照组，比较三组患者相关指标的差异及其相关性。 结果 缓解期组呼气流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)、哮喘控制测试评分(ACT)均显著高于急性发作组(P 0.05)，具有可比性。

    纳入标准：急性发作组和缓解期组患者的诊断均符合中华医学会呼吸学病组2008年制订的《支气管哮喘及防治指南》中的诊断标准；健康人群来自于到我院体检中心进行常规体检的健康人群。排除标准：合并严重的心、肝、肾疾病的患者；神经、精神性疾病致认知、交流障碍的患者；合并系统性红斑狼疮的患者；合并风湿或免疫性疾病的患者。

    1.2 标本采集

    对所有患儿进行诱导痰采集：首先嘱患儿使用氧气射流雾化吸入4.5%的生理盐水后，将患儿的鼻腔分泌物清除，并进行漱口、吞水以及反复深咳等动作，获得至少1 g以上的痰液量，并将无唾液成分的痰液置于离心管中，并加入2倍于痰液体积的0.1%二硫苏糖醇孵育后螺旋震荡15 s，之后将离心管置于37℃的恒温水浴震荡箱中进行震荡15 min。将离心管置于3500 r/min的离心机中离心20 min，取上清液置于-70℃的环境中冰冻待检测。将收集到的痰液标本置于低倍镜下进行观察，每低倍镜视野见到鳞状上皮细胞小于10个、白细胞数目大于25个且无痰液成分、痰液重量大于1 g的标本视为合格痰标本。

    1.3 主要试剂与仪器

    IL-17、IL-33、IL-5、IL-4、IL-2、IL-6、IL-8的检测试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司，IFN-γ的检测试剂盒购自北京原子高科核技术应用股份有限公司。T细胞亚群的检测试剂盒购自法国Besancon公司。具体仪器包括台式高速离心机、微量加样器、日本AS-407型肺功能检查仪、低温冰箱及酶标仪等。

    1.4 检测方法

    所有患者均于入组后第2天抽取清晨空腹肘静脉血3～4 mL，注入到不抗凝试管凝固后，以转速3000 r/min的速度离心15 min，提取血清置于-70℃的冰箱中保存备用。采用放射免疫法对入组患者的血清IL-17、IL-33、IL-5、IL-4、IL-2、IL-6、IL-8、γ-干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)进行检测 ......