异氟醚对老年大鼠空间学习记忆能力及海马RhoA蛋白表达的影响
次数,1材料与方法,1动物分组,2模型建立,3行为学实验方法,4标本制备,5RhoA分析,6统计学方法,2结果,1一般情况,2三组大鼠行为学实验结果比较,3三组大鼠免疫组织化学反应结果,3讨论
张文超 王 庚 胡中华 段开明 欧阳文▲1.北京积水潭医院麻醉科,北京 100035;2.中南大学湘雅三医院麻醉科,湖南长沙 410083
近年来,许多研究从大脑海马区神经突触形态学的变化来探究神经结构对学习记忆功能的影响。异氟醚对神经轴突与树突结构有很大的可塑性,而这种可塑性的变化可能是学习与记忆能力的细胞基础[1]。Rho 蛋白家族是与受体偶联的小G 蛋白家族,分子量为20~30 kD,属于Ras 超家族成员,在细胞内信号传导中具有重要的功能[2]。 其主要成员RhoA 蛋白调节细胞肌动蛋白骨架的聚合, 对神经纤维延长与塌陷、神经生长方向具有导向作用,通过对肌动蛋白的调控而起调控树突状伪足和树突棘形态的动态变化,影响神经可塑性,而这一现象在学习基本形式的长时程增强(LTP)中有充分的体现[3]。 本研究以老龄SD 大鼠作为研究对象,通过建立吸入麻醉模型,使用动物行为学实验观察异氟醚麻醉后老年大鼠兴奋性、探索性指标以及空间辨别能力的变化,通过免疫组织化学方法观察大鼠海马区RhoA 蛋白的表达变化,为探讨22月龄大鼠短时间异氟醚麻醉后兴奋性、空间辨别能力改变的的机制提供理论依据,从而更好地阐明吸入异氟醚后对认知功能障碍的发病机制。
1 材料与方法
1.1 动物分组
22 月龄老龄SD 大鼠,订购于湖南农业大学动物科技学院实验动物养殖场(生产许可证SCXK 湘2006-0001)体重550~620 g。 饲养条件为(22±1)℃,相对湿度40%~50%,自然昼夜非直接光照。经穿梭箱回避实验筛选出30 只学习记忆能力正常的大鼠, 随机分为对照组C 组(n = 10)、麻醉后24 h Ⅰ组(n = 10)和麻醉后72 h Ⅱ组(n = 10)。
1.2 模型建立
采用Deatex-Ohmeda 气体监测仪监测自制麻醉箱中异氟醚浓度。待麻醉箱内异氟醚浓度调节至3%时将麻醉组大鼠放于麻醉箱内5 min,再将处于诱导状态的老年大鼠,置于自制拱形气管插管台上,采用经口明视气管插管方法,将14G 静脉套管经钢丝引导插入老鼠气管中[4]。PetCO2探头确定气管插管操作成功后,将气管导管与麻醉机相连, 大鼠自主吸入麻醉气体,异氟醚浓度调为2%。 应用鼠尾无创血压检测仪与分析系统(北京中西远大科技有限公司)于麻醉诱导前,麻醉诱导过程中,麻醉维持2 h 与苏醒后分别检测大鼠鼠尾无创收缩压、舒张压、平均动脉压(MAP)、心率(HR)。 麻醉结束后,大鼠在吸入纯氧下自然苏醒 ......
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