响应曲面法优化附子多糖的微波提取工艺
苯酚,批号,1材料与方法,2试验方法,3附子多糖含量测定,4单因素试验,5响应曲面试验设计,2结果与分析,1标准曲线的绘制,2单因素试验,3响应曲面试验设计结果,4响应面分析拟合回归方程的方差分析,5响应曲面图形分析,6最
朱盛林 郑玲利 袁明勇 赵 霞成都医学院第一附属医院药剂科,四川成都 610500
附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根的加工品,中药中“回阳救逆第一品”。 附子中的主要化学成分有生物碱、多糖、苷类、甾醇、无机盐等。研究表明,中药多糖具有免疫调节[1]、抗肿瘤、抗感染、抗病毒、抗氧化[2-3]、抗辐射、降血糖、降血脂[4]、保肝等多种药理作用。 附子多糖无明显毒性,其低毒性已受到人们的重视[5]。
作为水溶性化合物, 附子多糖是中药临床使用中较大量的成分,因此,对其提取方法及含量的研究有重要意义。传统的附子多糖的提取工艺研究,均采用煎煮方法[6-7],可能会导致多糖部分水解。而微波辅助法提取多糖,可以缩短实验和生产时间,同时还可以提高提取率及产品纯度,并且节省溶剂。本试验首次采用微波辅助提取法进行附子多糖的提取[8-9],运用响应面法[10]确定提取时间,提取温度和料液比对于附子多糖提取率的影响, 以获得附子多糖提取最佳条件。
1 材料与方法
1.1 材料
调温电热套(北京中兴伟业仪器有限公司)、循环式真空水泵(巩义市予华仪器有限公司)、旋转蒸发仪(上海申顺生物科技有限公司)、离心机(上海安亭科学仪器制造厂);紫外可见光光度计UV-1100 型(上海美谱达仪器有限公司)等。 附子购于四川江油(批号:20140219)、无水乙醇(批号:20130102)、苯酚(批号:20140221)、浓硫酸(批号:20130817)、三氯甲烷(批号:20131013)、正丁醇(批号:20131025)、蒸馏水,无水葡萄糖 (批号:20140228)、 邻苯三酚 (批号:20130822)、 稀盐酸 (批号:20140418)、Tris (批号:20140308)等为分析纯。
1.2 试验方法
1.2.1 粗多糖提取 附子用自来水清洗干净,用蒸馏水漂洗2 次,烘干至恒重,粉碎过60 目筛,备用。取干燥的附子粉5 g,加入适量80%乙醇回流3 h 脱脂,抽滤,药渣挥尽乙醇。 脱脂后药渣浸泡于蒸馏水中30 min,放入微波炉中提取,浓缩提取液为20 mL,加入无水乙醇配置为80%的乙醇溶液,于4℃冰箱内放置12 h后取出,4000 r/min 离心5 min。 弃上清液,依次用无水乙醇、乙醚清洗沉淀 ......
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