全反式维甲酸对腹膜透析相关性腹膜纤维化大鼠转化生长因子β1、结缔组织生长因子、α 平滑肌肌动蛋白表达的影响
胞外基质,1材料与方法,1实验动物,2药品与试剂,3方法,4统计学方法,2结果,1四组实验大鼠的一般情况变化,2四组实验大鼠的腹膜功能测定情况,3四组实
李敏芝 熊燕移 史伟文 张莞灵 卓华钦广东省东莞市第三人民医院肾内科,广东东莞 523320
腹膜透析(peritoneal dialysis)是一种以人体腹膜为透析膜的透析方案, 操作时需将透析液灌注至腹腔, 并通过腹膜另一侧的毛细血管网交换溶质和水分,最终清除患者体内潴留的代谢产物,同时补充机体所缺乏的相关物质[1]。腹膜透析技术具有操作简便、血流动力学影响小、 残余肾脏功能保护好等优势,但也存在腹膜纤维化等相关并发症。腹膜纤维化是腹膜透析主要并发症之一,也是多数腹膜透析患者退出腹膜透析的主要原因[2]。 全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA) 是动物体内维生素A 代谢的中间产物,具有广泛的生理学及药理学效用,为分析该药物在腹膜透析中的抗腹膜纤维化中的作用,本研究选取雄性SD 大鼠进行研究,现报道如下:
1 材料与方法
1.1 实验动物
选择40 只雄性SD 大鼠,周龄6~8 周,体重220~260 g,由山东大学动物实验研究中心提供,动物合格证号:SCKX20140017; 所有大鼠均喂养于室温24℃、安静、光照12 h、湿度45%、自由进食进水的环境中,编号后随机分为对照组、模型组、实验1 组、实验2组,每组各10 只。
1.2 药品与试剂
选用庆华邦制药有限公司生产的ATRA;选用美国Baxter 医疗用品有限公司生产的4.25%腹膜透析液; 选用武汉博士德生物工程有限公司生产的兔抗大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)以及α 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)多克隆抗体;选用美国Sigma 公司生产的二甲亚砜;选用福州迈新生物技术开发有限公司生产的浓缩型DAB 显色剂;选用立陶宛MBI 公司生产的逆转录试剂盒;选用京博大泰克生物基因技术有限公司生产的PCR反应缓冲液。
1.3 方法
1.3.1 造模方法 对照组:腹腔注射生理盐水10 mL/d+5 mL 磷酸盐缓冲液稀释的二甲亚砜;模型组:腹腔注射4.25%腹透液10 mL/d+5 mL 磷酸盐缓冲液稀释的二甲亚砜;实验1 组:腹腔注射4.25%腹透液10 mL/d+ATRA 2 mg/kg;实验2 组:腹腔注射4.25%腹透液10 mL/d+ATRA 5 mg/kg。 所有大鼠均药物干预4 周,期间自由进食、饮水。
1.3.2 检测指标 干预4 周后处死大鼠,处死前1 h 对大鼠进行腹膜平衡实验 ......
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