白首乌C21甾苷对慢性心力衰竭大鼠新生血管形成及胰岛素样生长因子-1表达的影响
顺应性,左心室,1材料与方法,1实验动物,2白首乌C21甾苷的提取,3方法,4统计学方法,2结果,1各组大鼠左心室舒张期压力-容积曲线,2各组大鼠心肌组织MVD比较,3各组大鼠CD
惠 勇黑龙江省牡丹江市第二人民医院老年病科,黑龙江牡丹江 157011
慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是常见的心血管疾病, 常伴有心血管系统血流动力学障碍及神经内分泌代谢功能紊乱[1-2]。 世界范围内大约有15 亿例CHF 患者,每年新增病例400 万例[3]。现阶段,CHF 是65 岁老人住院的主要原因[4]。 因此,寻找CHF安全有效的治疗方法或治疗药物显得尤为重要。白首乌C21甾苷能够清除超氧阴离子自由基和羟自由基,是白首乌中的主要活性成分[5],但是,其对CHF 的影响鲜见报道。 本研究旨在观察白首乌C21甾苷对CHF大鼠左心室顺应性、微血管密度(MVD)、CD34+细胞动员及胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1,IGF-1)表达的影响,为明确白首乌C21甾苷防治CHF 提供实验依据,探讨其可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康清洁级Wistar 系大鼠40 只,体重200~250 g,购于哈尔滨医科大学动物实验中心,实验动物合格证号:P00102012, 实验动物使用许可证号:SYXK (黑)2012-033。 饲养于标准环境, 自由饮食,12 h 光照周期。 所有实验操作均遵守《中国动物实用指南》。
1.2 白首乌C21 甾苷的提取
白首乌C21甾苷由牡丹江市第二人民医院炮制室制备。经紫外分光光度法分析,C21甾苷含量达65%左右(按孕甾烯醇酮计)。
1.3 方法
1.3.1 心肌梗死后CHF 模型的建立及实验分组 参照文献[6-8] 方法实施左冠状动脉前降支结扎术建立CHF 模型。共成功建立CHF 模型17 只,成功率为56.7%。随机分为两组:模型组8 只,给予等体积生理盐水;白首乌C21甾苷组9 只,参照文献[9]并结合预实验结果,给予白首乌C21甾苷1.0 g/kg。另设假手术组10只,开胸后在左冠状动脉前降支下方只穿线不结扎,等体积生理盐水灌胃。 各组均为1 次/d 灌胃,共3 周。
1.3.2 流式细胞术 大鼠尾静脉采血0.5 mL、枸橼酸钠抗凝、Pharmingen 染色缓冲液稀释。取2 根试管,各加入100 μL 全血, 然后1 管加入20 μL PE/cy5 antimouse CD34, 另1 管加入20 μL anti-CD34-FITC 暗处孵育25 min 后,加入2 mL 红细胞裂解液 ......
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