葡萄糖调节蛋白GRP78在小梁网细胞中的表达及临床意义
内质网,眼科,1材料与方法,2结果,3讨论
柴 芳 卓业鸿 杨新光▲.西安交通大学医学院附属广仁医院 陕西眼科医疗中心 西安市第四医院眼科,陕西西安 70004;.中山大学中山眼科中心 眼科学国家重点实验室,广东广州 50060葡萄糖调节蛋白GRP78在小梁网细胞中的表达及临床意义
柴芳1卓业鸿2杨新光1▲
1.西安交通大学医学院附属广仁医院陕西眼科医疗中心西安市第四医院眼科,陕西西安710004;2.中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室,广东广州510060
目的 检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在体外培养的正常人小梁网细胞(NTM)及原发性开角型青光眼(POAG)患者小梁网细胞(GTM)中蛋白及mRNA表达差异及临床意义。 方法 将体外培养的NTM及GTM细胞分为衣霉素(Tm)组、十字孢碱(STS)组及对照组,采用Real-time PCR、Western blot方法检测药物处理6、24 h后小梁网细胞中GRP78mRNA及蛋白表达。结果原代培养的GTM细胞中GRP78表达水平明显低于NTM细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。Tm可增加NTM、GTM细胞中GRP78的表达,但后者的增高水平明显低于前者,差异有统计学意义(P<0.05)。GTM细胞对STS的反应大于NTM细胞。结论 POAG患者小梁网细胞对内质网应激反应能力低下,GRP78表达明显下调,对损伤性刺激的敏感性增强,提示GRP78蛋白可能在内质网应激诱导产生的小梁细胞凋亡中起保护作用。
青光眼;小梁网细胞;内质网应激
青光眼为全球主要不可逆性致盲眼病,原发性开角型青光(primary open-angle glaucoma,POAG)是青光眼中的常见类型,其发病机制未明[1]。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是近年新崛起的青光眼发病机制研究热点。葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)作为ERS的关键伴侣蛋白,其高表达是细胞对病理应激的重要防御机制之一[2-3]。近几年国内外广泛开展针对GRP78的作用机制研究,提出2型糖尿病、肿瘤患者细胞内GRP78呈高表达[4-6]。同时研究表明,GRP78对敏感神经元、缺氧晚期心脏组织具有保护作用,可抑制肝细胞内脂肪合成等[7-8],其功能研究已引起生物学家们的广泛重视。本研究通过体外培养正常人小梁网细胞(NTM)及POAG患者小梁网细胞(GTM),采用衣霉素(Tunicamycin,Tm)、十字孢碱(Staurosporine ......
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