高糖环境下人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮支架体外成骨能力检测
1料与方法,2果,3论
张彧婷 孙 权 沙 峰 孙石柱 姚立杰 李静平 沈 雷齐齐哈尔医学院解剖学教研室,黑龙江齐齐哈尔161006
高糖环境下人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮支架体外成骨能力检测
张彧婷 孙 权 沙 峰 孙石柱 姚立杰 李静平 沈 雷
齐齐哈尔医学院解剖学教研室,黑龙江齐齐哈尔161006
目的探讨脱细胞真皮支架在高糖环境下对骨髓间充质干细胞(hBMSC)的保护作用,以及促进hBMSC向成骨细胞分化的能力。方法建立脱细胞真皮基质和含300mmol/L葡萄糖的细胞高糖模型,在高糖环境下,培养hBMSC为高糖对照组,在高糖条件下,hBMSC种植在脱细胞真皮基质上为基质实验组,正常条件下培养的hBMSC为正常对照组,每组均进行成骨细胞诱导实验。利用MTT实验检测hBMSC的增殖情况;利用骨形成蛋白-1(BMP-1)免疫荧光染色检测hBMSC成骨细胞分化情况,ELISA实验检测各组hBMSC的BMP-1、碱性磷酸酶(ALP)的含量。结果与高糖对照组比较,基质实验组hBMSC的细胞增殖光密度(OD值)升高,差异有统计学意义(P<0.01);hBMSC在脱细胞真皮基质的生长状态良好,基质实验组BMP-1染色阳性的细胞数目明显高于高糖对照组(P<0.01);基质实验组BMP-1、ALP等蛋白的含量明显增高(P<0.01)。结论高糖环境下,脱细胞真皮基质有利于促进hBMSC分化为成骨细胞。
高糖;骨髓间充质干细胞;脱细胞真皮基质;成骨细胞
糖尿病是一种以高血糖为典型表现的复杂性全身疾病,高血糖状态常导致血管、神经发生严重的病理改变[1]。Palmer BF认为:糖尿病及其并发症已经成为影响我国等国家发展的重要影响因素[2],人口老龄化和糖尿病患病人数的增多常导致糖尿病患者骨质疏松,骨折不易愈合等严重问题[3],加重患者家庭及社会经济负担[4]。如何改善糖尿病骨质状况,加速糖尿病性骨损伤的修复是迫切需要解决的问题。
脱细胞皮肤基质间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)由于具有来源广泛、低免疫性、多分化等优势,为逆转糖尿病性组织缺氧和促进组织修复带来了希望,是细胞治疗和骨组织工程技术首选的种子细胞[5]。皮肤组织的再生能力非常强,脱细胞真皮细胞外基质具有复杂的三维结构[6],是具有广泛应用前景的生物组织支架材料,对支持移植细胞生长、促进组织修复具有关键效果[6]。但是高糖状态下,MSC在脱细胞真皮基质的成骨分化尚鲜见报道。本研究拟揭示高糖环境下,MSC在脱细胞真皮基质的生长和成骨分化情况 ......
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