张维 乔录新 丁渭 陈德喜 张玉林▲

    1.首都医科大学附属北京佑安医院，北京100069；2.北京市肝病研究所，北京100069

    核苷类似物对小鼠肝脏线粒体DNA D-loop区突变的影响

    张维1*乔录新1，2*丁渭1陈德喜2张玉林1▲

    1.首都医科大学附属北京佑安医院，北京100069；2.北京市肝病研究所，北京100069

    目的探讨长期使用核苷类似物(NA)是否导致肝脏线粒体DNA(mtDNA)D-loop区损伤。方法选取7周龄Balb/C小鼠25只，将其随机分为对照组和4个NA实验组。对照组腹腔内注射双蒸水，各实验组分别给予司他夫定(D4T)50mg/kg、齐多夫定(AZT)100mg/kg、拉米夫定(3TC)50mg/kg和去羟肌苷(DDI)50 mg/kg，分别腹腔内注射，每周5次，共12周。取各组小鼠肝组织，通过激光捕获显微切割获取肝细胞，对mtDNA D-loop区克隆和测序。结果DDI组肝组织中mtDNA拷贝数(0.440±0.040)和肝细胞中mtDNA拷贝数(0.464±0.013)均较对照组[(1.000±0.080)、(1.000±0.058)]显著减少，差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区与参考序列的平均距离为(0.0037±0.0019)，3TC组为(0.0031±0.0017)，DDI组为(0.0035±0.0028)，与对照组(0.0018±0.0017)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区平均同义替换率(dS)为(0.0060±0.0010)，3TC组为(0.0050±0.0007)，与对照组(0.0030±0.0007)比较差异有统计学意义(P<0.05)。DDI组肝细胞D-loop区平均错义替换率(dN)为(0.0020±0.0010)，与对照组(0.0008±0.0003)比较差异有统计学意义(P<0.05)。AZT组肝组织D-loop区的“A→G”转换率(0.001 90)较对照组(0.000 62)高，差异有统计学意义(P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区的“T→C”转换率为0.001 28，3TC组为0.001 75，较对照组(0.000 58)显著增高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长期暴露于核苷类似物可导致小鼠肝细胞mtDNA D-loop区病变，主要突变类型为转换，主要的转换为“A→G”和“T→C”。

    D-loop区；线粒体DNA；肝细胞；核苷类似物

    核苷类似物(NA)用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)和乙型肝炎病毒(HBV)感染[1] ......