朱红娜 乔瑛 苏安乐 张婷 柏凌 梁厚成

    1.西安市第一医院眼科,陕西西安710002；2.西安交通大学第二附属医院眼科,陕西西安710004

    蓝光照射人视网膜色素上皮细胞后通过增加细胞内钙离子浓度促进凋亡的机制

    朱红娜1乔瑛1苏安乐1张婷1柏凌2梁厚成1

    1.西安市第一医院眼科,陕西西安710002；2.西安交通大学第二附属医院眼科,陕西西安710004

    目的观察蓝光对人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法细胞株分为蓝光照射组和对照组。蓝光照射组,利用35 W白色冷光灯加用蓝色滤光片建立蓝光损伤体外培养的RPE细胞模型,蓝光控制波长范围470～520 nm,光照强度在2000 lx左右,光照时间24～96 h,实验过程中保证光照在细胞培养孵箱内密进行。对照组为常规避光孵箱培养细胞,除无光线照射外,各培养条件相同。利用流式细胞仪检测RPE细胞的凋亡变化,利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测RPE细胞内游离钙离子浓度。结果与对照组比较,蓝光照射组的RPE细胞凋亡增加(P<0.05)；照射组的RPE细胞内游离钙离子浓度增加(P<0.05)；通过特异性抑制L型电压依赖性钙离子通道功能降低RPE细胞内游离钙离子浓度,在一定程度上降低了蓝光引起的RPE细胞凋亡。结论蓝光可以通过增加RPE细胞内游离钙离子浓度促进RPE细胞的凋亡,L型电压依赖性钙离子通道有望成为治疗年龄相关性黄斑变性等视网膜变性疾病的新靶点。

    蓝光;人视网膜色素上皮细胞;凋亡;细胞内钙离子浓度

    年龄相关性黄斑变性的病发病机制复杂,目前尚未完全阐明且疗效欠佳,是引起中老年人发生视力缺损甚至致盲的主要疾病之一[1-2]。因此,研究年龄相关性黄斑变性的发病机制有重要意义。年龄相关性黄斑变性与视网膜光损伤有相似的病理过程,视网膜光损伤是研究年龄相关性黄斑变性等视网膜变性疾病的良好模型[3]。已有研究证实,光损伤过程中,视网膜色素上皮细胞的凋亡增加,且损伤程度和光暴露的剂量成正比,但其具体机制还未阐明[4-5]。近年来大量文献报道,作为重要的第二信使,细胞内钙离子浓度对参与调控细胞的增殖、分化、矿化、自噬和凋亡等过程,而钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道进入细胞是钙离子进入RPE细胞的主要方式[6-7]。本研究通过蓝光照射体外培养的人视网膜色素上皮细胞,检测其凋亡水平的变化及细胞内钙离子水平,以探究光暴露对人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响和可能的机制,旨在为年龄相关性黄斑变性等视网膜变性疾病发病机制的研究提供理论依据。

    1 材料与方法 ......