王文革 李军强 石 菲 李洪涛

    1.兰州军区临潼疗养院附属医院普外科，陕西西安710600；2.兰州军区总院普外科，甘肃兰州730050

    上调Sema3A表达水平对结肠癌细胞侵袭、增殖能力的影响

    王文革1李军强1石 菲1李洪涛2

    1.兰州军区临潼疗养院附属医院普外科，陕西西安710600；2.兰州军区总院普外科，甘肃兰州730050

    目的探索上调Sema3A表达水平对结肠癌细胞侵袭、增殖水平的影响。方法构建Sema3A正义表达载体，慢病毒包装后感染人结肠癌SW620细胞，获取稳定过表达的Sema3A结肠癌细胞株。实验同时设置空白对照组、阴性对照组。行Transwe11、MTT、克隆形成实验探索过表达Sema3A对SW620生物学行为的影响。结果成功构建过表达Sema3A的人结肠癌SW620细胞株。与阴性对照组比较，Sema3A过表达细胞株的增殖速度减慢，克隆形成率下降，侵袭能力降低，差异均有高度统计学意义(P<0.01)。结论外源性上调Sema3A表达水平可降低SW620体外增殖、侵袭转移能力，提示Sema3A对结肠癌生长、侵袭存在抑制作用。

    Sema3A；结肠癌；增殖；侵袭

    结肠癌(Co1orecta1 cancer，CRC)为最常见的消化道癌症之一，发病率高居恶性肿瘤的第三位。西方国家结肠癌死亡率高居癌症类疾病前三位[1]。随着饮食结构变化，近年我国CRC发病和死亡人数逐年递增[2]。从良性腺瘤或囊肿发展到晚期结肠癌、转移瘤，包含了基因、蛋白质水平的多重改变[3]。臂板蛋白3A抗体(Semaphorin3A，Sema3A)是导向蛋白Semaphorin家族中的重要分子之一[4]，其有拆解细胞骨架、纤丝状肌动蛋白等功能[5-6]。随着研究的深入，发现Sema3A除了可以促进神经元生长、再生，还能调节肿瘤细胞的生长、增殖水平[7]。在多种癌症组织或细胞中，Sema3A均有不同程度的表达下调或缺失，从而抑制癌细胞的增殖、侵袭、转移[8]。本研究旨在观察Sema3A在结肠癌细胞侵袭、增殖中的作用，探索过表达Sema3A对结肠癌细胞的生物学行为的影响，揭示其抑制结肠癌增殖、侵袭的作用机制，为临床研究提供相应试验依据。

    1 对象与方法

    1.1 仪器与试剂

    人结肠癌细胞株SW620引自中科院上海细胞库。慢病毒病毒载体(Lentivirus-Sema3A)、阴性对照载体(CON145)以及慢病毒包装试剂盒(上海吉凯基因化学技术有限公司)。四季青胎牛血清(浙江天杭生物科技股份有限公司) ......