m iR-342-3p抑制SM 22α启动子的转录活性
平滑肌,表型,位点,员资料与方法,2结果,3讨论
尚 丹 李美红 许 馨 曹山虎 孙绍光1.北京铁路局石家庄卫生防疫站,河北石家庄050000;2.山东省招远市人民医:药剂科,山东招远265400;.河北医科大学基础医学:生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017m iR-342-3p抑制SM 22α启动子的转录活性
尚丹1*李美红2*许馨3曹山虎3孙绍光3
1.北京铁路局石家庄卫生防疫站,河北石家庄050000;2.山东省招远市人民医:药剂科,山东招远265400;3.河北医科大学基础医学:生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017
目的探究miR-342-3p是否通过作用于SM22α启动子,从转录水平调控SM22α的表达。方法通过软件RNAhybrid分析发现,大鼠SM22α启动子中存在一个miR-342-3p的识别位点。将miR-342-3pmimics与报告基因载体pGL3-SM22α-Promoter共转染293A细胞,通过检测荧光素酶活性来分析miR-342-3p对SM22α启动子转录活性的影响。将miR-342-3p mimics转染血管平滑肌细胞,采用qRT-PCR和Western blot分别检测SM22α mRNA和蛋白质水平,分析miR-342-3p对血管平滑肌细胞中SM22α表达的影响。结果与miR-control相比,miR-342-3p能够使SM22α启动子转录活性降低(0.54±0.03)倍,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-control相比,miR-342-3p能够使血管平滑肌细胞中SM22αmRNA水平降低(0.45±0.04)倍,SM22α蛋白质水平下降(0.41± 0.05)倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-342-3p通过抑制SM22α启动子活性,从转录水平降低SM22α的表达,为miRNA调控血管平滑肌细胞表型转化研究提供了新角度。
microRNA;miR-342-3p;SM 22α;启动子
[Avsteact]Ov jective To explore whethermiR-342-3p could repress the expression of SM22αat the transcriptional level by targeting its promoter.M ethods Therewas a potential binding site ofmiR-342-3p in the SM22αpromoter analyzed by using RNAhybrid software.293A cells were co-transfected with miR-342-3p mimics and pGL3-SM22α-Promoter reporter gene vectors ......
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