付浩++孙圣凯++陈孝储++闫海洋+王志宏

    [摘要] 目的 探讨高血压大鼠外周血液白细胞线粒体DNA拷贝数和端粒长度的变化，以及二者之间的相关性。 方法 SD大鼠40只，随机分为3组：高血压组(15只)、假手术组(15只)和空白对照组(10只)。高血压组采用双侧肾动脉后支结扎，术后予以8% NaCl饲料的方法构建高血压大鼠模型。选取术后4个月为观察终点，利用鼠尾血压计测量血压，随后行眶下静脉丛取血，提取血液基因组DNA，Real-time PCR法测量相对线粒体DNA拷贝数和端粒长度。 结果 术后4个月时与假手术组比较，高血压组大鼠血压显著升高[(178.36±10.21)比(128.47±8.74)mmHg，P < 0.01]，线粒体DNA拷贝数显著增加[(1.49±0.43)比(1.09±0.51)，P < 0.05]，端粒长度显著缩短[(0.83±0.23)比(1.04±0.29)，P < 0.05]。高血压组大鼠线粒体DNA拷贝数与端粒长度变化呈负相关(r= -0.589，P < 0.05)。 结论 高血压大鼠模型可出现外周血白细胞线粒体DNA拷贝数升高和端粒长度缩短，且二者呈负相关。

    [关键词] 高血压；mtDNA拷贝数；端粒；大鼠

    [中图分类号] R544.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2016)11(a)-0033-04

    高血压是心血管疾病的主要危险因素之一，在我国成人中，高血压发病率可高达29.6%，已成为我国一个严重的公众健康负担[1]，其主要危害在于随患病时间的延长，可引起动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中等多种年龄相关疾病[2-3]。近期有研究显示，线粒体功能障碍和端粒缩短不仅是细胞老化过程中的两个关键进程，二者之间还可能存在着相互作用[4]，但是目前尚无研究涉及高血压疾病中线粒体和端粒功能之间的可能联系。因此，本研究旨在通过利用线粒体拷贝数和端粒长度的变化，来探索高血压大鼠模型中线粒体和端粒功能之间的联系，或可为高血压继发疾病的发病机制探索及早期治疗提供更多的基础研究支撑。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    成年雄性SD大鼠40只，7～8周龄，体重220～250 g(军事医学科学院动物实验中心，合格证号0033432)。血液基因组DNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司)，UltraSYBR Mixture With ROXⅡ(北京康为世纪生物科技有限公司)，Real-time PCR引物(安徽通用生物系统有限公司)，Real-time PCR仪(Step One Plus ......