磁珠核酸提取方法在血浆EBV—DNA实时荧光定量PCR检测中应用的性能评价
郑瑜宏+钟凤金+陈岩松[摘要] 目的 评价磁珠核酸提取方法在血浆EB病毒DNA(EBV-DNA)实时荧光定量PCR检测中应用的性能。 方法 采用自动化磁珠法提取核酸,并结合实时荧光定量PCR测定EBV-DNA,利用第三方定值参考物质评价该方法的检测性能。同时选取100例鼻咽癌患者,分别用磁珠法与煮沸法定量检测其血浆EBV-DNA,比较分析两种方法的相关性。 结果 基于自动化磁珠法的实时荧光定量PCR系统检测EBV-DNA,其低、中、高水平的重复性精密度均0.05可知,数据符合统计学线性。因此,磁珠法线性范围为5.4×101~5.4×105 U/mL。见表4。
2.1.4 抗血红蛋白干扰能力 由表5可知,血浆样本中Hb干扰物的浓度低于8.667 g/L时,对3个水平定值参考物的检测偏倚均小于±7.5%,表示检测结果未被明显干扰。
2.2 方法学比对结果
两种方法检测结果均阳性的样本有78例,均阴性的样本有5例,不符合的有17例,阴阳性符合率为83%。将两组检测结果做相关分析,可知二者呈线性相关,回归方程为Y=0.324X+2.593,相关系数为R2=0.420,P=0.000。见图1。
3 讨论
近年来,随着临床对EBV-DNA检测指标重视程度的逐渐提高,国内开展EBV-DNA检测的临床实验室数量越来越多,然而由于我国现有EBV-DNA试剂盒检测结果不尽如人意 ......
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