张园 张泉 孟春

    [摘要] 目的 探讨骨髓间充质干细胞移植前后对动脉粥样硬化大鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞数量的影响，以及对相关炎症因子及动脉粥样硬化(AS)的影响。 方法 90只雄性Wistar大鼠分正常饮食组(30只)和高脂饮食组(60只)，并将高脂饮食组大鼠分对照组(30只)和移植组(30只)，移植组经尾静脉注射MSCs悬液(细胞1×106溶于200 μL PBS中)，对照组给予200 μL PBS，采用全自动生化仪分析总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，ELISA法测定外周血血清中水平，应用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3 Treg细胞水平，采用苏木精-伊红染色观察组织学变化。 结果 组织学分析表明成功建立了动脉粥样硬化模型。对照组大鼠血脂、炎症因子较正常饮食组的水平升高(P 0.05)；移植第4周与对照组比较，移植组血脂明显降低，差异有统计学意义(P 0.05)；移植第4周与对照组比较，移植组两者水平明显降低，差异有统计学意义(P 0.05)；移植第4周组与对照组比较，两者水平明显升高，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表3、图2～3。

    2.5 骨髓间充质干细胞形态

    接种后细胞在培养瓶中散在分布，呈圆形。原代培养：24 h后开始贴壁，72 h后贴壁细胞表現为多角形、不规则或圆形，单个生长，5～7 d逐渐形成集落，形态呈长线形、不规则或多角形，仍能见圆形细胞夹杂，10 d后细胞集落快速增殖，细胞开始聚集生长，逐渐形成“漩涡状”，部分大的集落开始融合，14 d时大的集落相互重叠融合。传代培养：传代6 h后细胞慢慢贴壁呈长梭形伸展，均匀生长并逐渐形成大的集落 ......