李美珠+朱嫦琳+陈斌鸿

    [摘要] 目的 探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与脑梗死的发生发展的相关性。 方法 选择2015年1月～2017年3月在佛山市第一人民医院(以下简称“我院”)神经内科住院的348例脑梗死患者作为病例组，选择同期我院体检科352名健康人群作为对照组，采用基因芯片方法进行ApoE基因型检测，比较两组ApoE基因型及表型的构成差异，及ApoE不同表型患者血脂水平。 结果 病例组和对照组ApoE基因型均以ε3/3频率最高，等位基因频率以ε3最高；病例组ε2/3和ε3/3基因型均低于对照组，差异有统计学意义(P 0.05)，具有可比性。本研究經我院医学伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

    1.2 方法

    1.2.1 采血处理 病例组研究对象于入院后未服用任何降脂药物前采血，对照组在体检时空腹采血。ApoE基因分型检测采用EDTA-K2抗凝管，分离血浆用于检测；血清脂蛋白水平检测采用促凝胶真空采血管，分离血清用于检测。

    1.2.2 血脂检测 血脂检测项目包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和小而密低密度脂蛋白(sdLDL)，采用西门子公司ADVIA Workcell自动化系统自动检验流水线及配套试剂。

    1.2.3 ApoE基因分型检测 采用PCR技术扩增特定的基因片段，并与芯片上特异性核酸探针杂交，通过检测ApoE基因112和158位点的6个型别(ε2/2、ε2/3、ε2/4、ε3/3、ε3/4和ε4/4)进行分型。ApoE基因型检测试剂盒(基因芯片法)购自珠海赛乐奇生物科技有限公司，采用Roche公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 48进行检测。DNA最低检出限为5.0×103 copies/mL，> 5.0×103 copies/mL判定为该位点阳性。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，等位基因频率用基因频率计数法计算，Hardy-Weinberg(H-W)平衡采用拟合优度χ2检验；计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验。以P 0.05) ......