持续压力对离体培养兔椎体终板内Wnt/β—catenin信号通路及VEGF的影响
血管内皮生长因子
展嘉文 冯敏山 王尚全 朱立国 韩涛 尹逊路 魏戌[摘要] 目的 研究持续压力对椎体终板内血管内皮生长因子(VEGF)及β-catenin表达的影响,进一步探讨VEGF与椎间盘退变之间的分子作用机制。 方法 将16只新西兰白兔处死后在无菌条件下取出脊柱运动节段,随机分为对照组与压力组,每组各8只,均放入离体加载和培养装置中进行培养,其中压力组予持续3 kg压力,对照组不予压力,于培养前及培养3、7及14 d时,两组各取10个样本,应用免疫组化、Western blot、Real-time PCR检测VEGF及β-catenin的表达情况。 结果 免疫组化检测结果显示,持续压力下培养7 d时,终板内VEGF强度显著下降(0.182±0.063),与对照组(0.237±0.051)比较,差异有统计学意义(P < 0.05);培养14 d时染色强度进一步降低,压力组(0.156±0.035)与对照组(0.211±0.038)比较,差异有统计学意义(P < 0.05);相反,持续压力上调了终板内β-catenin的表達,培养期间与对照组比较,差异均有统计学意义(P < 0.05)。Western blot结果显示,压力组与培养前及对照组比较,上调了β-catenin的表达,差异均有统计学意义(P < 0.05)。Real-time PCR结果显示,持续压力导致VEGF基因相对表达量减少(0.842±0.002),与对照组(0.965±0.005)比较,差异有统计学意义(P < 0.05)。 结论 持续压力导致离体培养兔脊柱运动节段内椎体终板VEGF表达下降、β-catenin表达上调,提示持续压力可能通过Wnt/β-catenin信号通路调节椎体终板内VEGF表达。
[关键词] 椎体终板;血管内皮生长因子;Wnt/β-catenin;持续压力;椎间盘退变
[中图分类号] R681.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2018)06(c)-0004-05
[Abstract] Objective To study the effect of consistence pressure on the expression of VEGF and beta -catenin in vertebral endplate, and further explore the molecular mechanism between VEGF and intervertebral disc degeneration. Methods A total of 16 New Zealand rabbits were sacrificed after removed under sterile conditions in the spinal motion segment ......
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