毕成 徐瑞成 邹爽 王聪聪 张妍 徐忠伟

    [摘要] 目的 探讨华蟾毒配基通过改变表观遗传修饰调控肝癌细胞死亡的机制。 方法 通过CCK-8法检测不同浓度(0、0.75、1.5、2.5、5、10 μmol/L)华蟾毒配基作用于肝癌HepG2细胞24 h细胞增殖能力的变化；5 μmol/L华蟾毒配基作用HepG2细胞12、24 h后，流式细胞术检测细胞周期，蛋白印迹检测钙/钙调素依赖蛋白激酶2β(CaMK2B)、甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)、磷酸化MeCP2(p-MeCP2)、乙酰化组蛋白H3.1(Ac-Histone3.1)和甲基化组蛋白(Met-Histone3.1)的表达变化；5 μmol/L华蟾毒配基作用HepG2细胞24 h后，细胞免疫荧光结合扫描共聚焦检测CaMK2B和MeCP2相互作用。 结果 华蟾毒配基能显著抑制肝癌HepG2细胞生长，抑制效果呈现浓度依赖性，差异有统计学意义(P < 0.05)，药物作用细胞后，细胞周期发生G2/M期阻滞，差异有统计学意义(P < 0.05)。5 μmol/L華蟾毒配基可促进CaMK2B和MeCP2在细胞核内结合，Western blot 结果显示华蟾毒配基作用HepG2细胞后上调CaMK2B和p-MeCP2表达(P < 0.05)，抑制Ac-Histone3.1表达，促进Met-Histone3.1(P < 0.05)。 结论 华蟾毒配基通过激活CaMK2B-MeCP2信号通路抑制组蛋白乙酰化、促进甲基化继而诱导肝癌细胞死亡。

    [关键词] 华蟾毒配基；肝细胞癌；钙调蛋白激酶；表观遗传

    [中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2018)08(b)-0004-05

    [Abstract] Objective To investigate the mechanism of cinobufagin in regulating the death of liver cells by regulating epigenetic modification. Methods The CCK-8 assay was used to detect the changes of proliferation ability after different concentrations (0， 0.75， 1.5， 2.5， 5， 10 μmol/L) of cinobufagin acting on the HepG2 cells for 24 h； after 5 μmol/L of cinobufagin acting on the HepG2 cells for 12 ......