戴有金 付鹤玲 鲍丹 郑媛 侯道荣

    [摘要] 目的 觀察CD47抗体对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠原代心肌细胞损伤的保护作用。 方法 分离培养40只1～3日龄的SD大鼠心肌细胞，使用ISO诱导原代大鼠心肌细胞损伤模型。采用随机数字表法将大鼠心肌细胞分为正常对照组(Control组)、模型组(ISO组)、治疗组(Anti-CD47+ISO组)。Control组，心肌细胞常规培养基培养；ISO组，常规培养基培养，加入ISO(10-5 mol/L)继续培养48 h；Anti-CD47+ISO组，常规培养基加入CD47抗体(7 μg/mL)培养12 h后，加入ISO(10-5 mol/L)继续培养48 h。测定培养细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量；使用Annexin-V与PI双染法及流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率；超氧化物阴离子荧光探针(DHE)染色检测心肌细胞活性氧(ROS)水平；Western blot检测心肌细胞CD47、Bcl-2和Bax蛋白的表达。 结果 与Control组比较，ISO组心肌细胞的凋亡率明显升高(P < 0.01)；与ISO组比较，Anti-CD47+ISO组可显著降低细胞凋亡率(P < 0.01)。与Control组比较，ISO组LDH、CK、MDA和ROS水平显著升高(P < 0.01)，SOD和NO水平显著降低(P < 0.01)；与ISO组比较，Anti-CD47+ISO组SOD和NO水平显著提高(P < 0.01)，LDH、CK、MDA以及ROS水平显著降低(P < 0.01)。Western blot结果显示，与Control组比较，ISO组CD47和Bax表达显著升高(P < 0.05、P < 0.01)，Bcl-2表达显著降低(P < 0.01)；相比于ISO组，Anti-CD47+ISO组CD47和Bax表达明显降低(P < 0.01)，Bcl-2表达明显升高(P < 0.05)。 结论 CD47抗体可能通过抑制ROS的产生、调节Bcl-2/Bax蛋白表达比例来抑制心肌凋亡，从而对ISO诱导的大鼠原代心肌细胞损伤产生保护作用。

    [关键词] CD47抗体；心肌细胞；异丙肾上腺素；抗氧化；抗凋亡

    [中图分类号] R542.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2018)09(b)-0013-06

    [Absract] Objective To investigate the protective effect of CD47 antibody on Isoproterenol (ISO) induced primary cardiomyocytes injury in rats. Methods The myocardial cells were isolated from 40 SD rats (1-3 days old). The model of primary myocardial cells injury was induced by ISO. The myocardial cells of rats were divided into normal control group (control group) ......