miRNA-1和miRNA-133过表达对诱导性多能干细胞心肌分化的影响
心肌细胞,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,1miPSC形态学特征,2各组miRNA-1,miRNA-133转染效率比较,3不同分化时间下cTnT在miPSC中的相对表达量变化
王芳芳 白宝宝 曾 迪 楚 轶 李 雪中国人民解放军空军军医大学第二附属医院心内科,陕西西安 710038
目前,心血管疾病,尤其是心肌缺血所导致的大量功能性心肌细胞死亡、损伤等,已成为威胁人类健康的首要杀手[1-3]。研究显示,自我更新和多向分化的干细胞能够分化再生成心肌细胞,这为心血管疾病的治疗带来了新的希望[4-7]。诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC),可从自体细胞逆分化获得,在避免伦理学争议的同时也解决了免疫排斥反应等难题[8-10]。然而,iPSC定向诱导分化目前还存在着靶细胞定向分化效率不高、分化机制尚未明确、靶细胞功能未趋向成熟等问题,阻碍了其在心肌组织工程再生中的应用。
microRNA(miRNA)是广泛存在于真核细胞内的一类内源性非编码小RNA,可调节mRNA的翻译,但不负责编码蛋白质,其序列高度保守,生物功能较广。其通过降解mRNA抑制蛋白质翻译表达,进而调控细胞的生长、分化、迁移、凋亡及组织发育。大量实验表明,已有40余种miRNA参与调控心肌生理和病理活动,其中miRNA-1和miRNA-133已被证实参与了胚胎期心肌生成及发育过程,且在肌组织中表达丰富。本研究旨在为进一步研究miRNA-1和miRNA-133在调控iPSC定向分化为心肌细胞过程中的作用,为促使iPSC更有效地向心肌细胞定向分化提供更为可靠的参考资料。
1 材料与方法
1.1 材料
美国国家癌症研究所(ICR)孕鼠来源自解放军空军军医大学第二附属医院动物中心,2周龄,10只,体重 9~12 g,合格证号 SCXK(陕)2017-0002,使用许可证号20170611。适应性饲养条件:配置好饲料、饮水、垫料,做好通风,12 h/12 h明暗交替 ......
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