熊琳 何晓琴 范黎 徐细明

    [摘要] 目的 探讨MK-2206作用于肝癌细胞huh7后对其生物学行为的影响及作用机制。 方法 体外培养人肝癌细胞系huh7，采用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40 μmol/L)MK-2206干预huh7细胞。采用CCK-8检测细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达。 结果 与对照组(0 μmol/L)比较，MK-2206对肝癌细胞huh7的增殖活性有明显抑制作用，且呈剂量依赖性和时间依赖性(P < 0.05);MK-2206诱导huh7细胞凋亡(P < 0.05)，显著抑制Akt的蛋白表达(P < 0.05)。 结论 Akt抑制剂MK-2206可通过调控PI3K/Akt信号通路来调控肝癌细胞huh7的生物学行为。

    [关键词] 肝癌;PI3K/Akt信号通路;MK-2206;增殖;迁移;凋亡

    [中图分类号] R735.7? ? ? ? ? [文献标识码] A? ? ? ? ? [文章编号] 1673-7210(2019)01(a)-0008-05

    肝癌是世界第六大常见癌症，也是发生癌症相关死亡的第三大原因，近年来其发病率及死亡率仍呈上升趋势[1]。我国肝癌患者人数占全世界肝癌患者的55%[2]。手术切除是肝癌的首选治疗方法，但肝癌发病隐匿，恶性程度高，进展速度快，根治性手术仅可用于不足30%的患者[3]。因此，系统性治疗在中晚期肝癌患者的治疗中扮演着重要角色。传统的化疗方法副作用大，疗效不佳，易耐药[4]。分子靶向药物索拉非尼可改善中晚期肝癌患者生存期，但其仅可延长总体生存期数月[5-6]。目前，迫切需要开发出新的靶向治疗药物。Akt是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是PI3K/Akt信号转导通路的重要靶点，该通路在调控肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭及自噬等方面中具有重要作用[7]，有望成为新的恶性肿瘤治疗靶点。MK-2206是一种人工合成的Akt特异性变构抑制剂，可有效抑制多种恶性肿瘤细胞增殖，促进细胞凋亡，具有良好的抗肿瘤活性[8-9]。本研究以肝癌细胞huh7为研究对象，探讨MK-2206的抗肝癌作用及其可能的作用机制，以期为其抗肿瘤研究和临床应用提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试药

    1.1.1 仪器? 超净工作台(美国AIRTECH);CO2细胞培养箱(德国Binder);普通及倒置显微镜(日本Olympus);离心机(德国Thermo);流式细胞仪(美国Bio-Rad);酶标仪(美国PerKin Elmer);超低温冰箱(New Brunswick Scientific)、电热恒温干燥箱(天津泰斯特仪器有限公司);SDS-PAGE电泳(北京六一生物科技有限公司);Odyssey双色红外激光成像系统(美国LI-COR)等 ......